本文關(guān)鍵詞：梅花鹿α干擾素基因在MDBK細(xì)胞中表達(dá)及抗BVDV活性檢測(cè)

  更多相關(guān)文章： 梅花鹿 α干擾素 真核表達(dá) 抗BVDV活性

【摘要】：采用基因工程技術(shù)克隆出梅花鹿α干擾素(IFN-α)成熟肽基因序列,并將其定向插入到真核表達(dá)載體pcDNA3.0(+),經(jīng)酶切、PCR及測(cè)序鑒定,成功構(gòu)建了pcDNA3.0-IFN-α真核重組表達(dá)質(zhì)粒。將鑒定正確的陽(yáng)性重組質(zhì)粒經(jīng)非脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染至MDBK細(xì)胞,間接免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)其具有較高轉(zhuǎn)染效率;Western blot法檢測(cè)IFN-α蛋白在MDBK細(xì)胞中得到有效表達(dá);病變抑制試驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的MDBK細(xì)胞具有明顯抗BVDV活性;抗BVDV活性的定量試驗(yàn)表明轉(zhuǎn)染pcDNA3.0-IFN-α質(zhì)粒的MDBK細(xì)胞與感染未轉(zhuǎn)染的MDBK細(xì)胞相比抗BVDV活力提高了66192倍。本試驗(yàn)在MDBK細(xì)胞中成功表達(dá)了梅花鹿IFN-α,并檢測(cè)出其具有明顯抗BVDV作用,這為梅花鹿IFN-α活性機(jī)理研究以及開(kāi)發(fā)更高效的抗梅花鹿病毒性疾病干擾素制劑提供物質(zhì)和理論基礎(chǔ)。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)校醫(yī)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院;
【基金】：吉林省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(201115194)
【分類(lèi)號(hào)】：S858.25
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:sufy110@163.com口蹄疫、病毒性腹瀉-黏膜病等病毒性疾病正嚴(yán)重危害梅花鹿養(yǎng)殖業(yè),目前尚未有治療梅花鹿病毒性疾病的特效藥物[1-3]。雖然抗病毒化學(xué)藥物能夠增強(qiáng)宿主抗病毒能力,但長(zhǎng)期使用會(huì)造成畜禽產(chǎn)品的藥物殘留,產(chǎn)生具有耐藥性的變異毒株,最

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄧宇;王新華;郭燕;鐘發(fā)剛;榮光;夏倫斌;陳琛;;抗BVDV卵黃抗體的制備[J];家畜生態(tài)學(xué)報(bào);2007年01期

2 吳文輝;余紅梅;劉婧怡;;對(duì)生豬感染BVDV的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2009年04期

3 熊慎蘇;;雜談BVDV[J];今日養(yǎng)豬業(yè);2011年03期

4 姚曉輝;李華強(qiáng);陳瑞愛(ài);練炳洲;王林川;鄧月嫦;王鳳國(guó);;BVDV熒光RT-PCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年11期

5 劉伯淳;用ELISA檢測(cè)BVDV抗體[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2000年01期

6 黃凱;張俊杰;劉英霞;齊長(zhǎng)明;邵小磊;馬宏磊;馬，

本文編號(hào)：1162558