本文關(guān)鍵詞：鹽堿化羊草草地固氮微生物的特性研究

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【摘要】：鹽堿化草地土壤中存在數(shù)量較多的能夠獨立進行固氮作用的自生固氮菌,這些細菌在土壤氮循環(huán)中的作用一直受到廣泛的關(guān)注。本研究利用改良Ashby無氮培養(yǎng)基平板,從松嫩鹽堿化草地帶有羊草凋落物的表層土壤樣品中分離出10株自生固氮菌株,通過形態(tài)學(xué)分析、生理生化反應(yīng)及16SrDNA序列分析等試驗對菌株進行鑒定,并對菌株固氮酶等酶活、促生特性以及優(yōu)勢菌株對羊草的促生作用進行研究。研究結(jié)果如下:1、通過形態(tài)學(xué)分析、生理生化特征分析及16SrDNA核酸序列分析,對篩選得到的10株自生固氮菌進行鑒定,初步確定為四株鏈霉菌(Streptomyces),兩株假單胞菌(Pseudomonas),一株土地戈登氏菌(Gordonia terrae),一株魯氏不動桿菌(Acinetobacter lwoffii),一株新金色分枝桿菌(Mycobacterium neoaurum),一株根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)。菌株Genbank核酸序列登錄號分別為KJ716539、KJ742897-KJ742905。全部菌株具有耐鹽堿性,可在Na Cl為4%和pH為10.5的培養(yǎng)基中生長良好;硫化氫試驗、接觸酶試驗陽性;大多數(shù)菌株明膠液化試驗、淀粉水解試驗、糖發(fā)酵試驗呈陽性,全部菌株均能在以絕大多數(shù)糖類為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長。2、對分離菌株的固氮酶活性進行研究,利用乙炔還原法進行測定,通過氣象色譜儀對乙烯相對生成量的檢測證明所有菌株均具有固氮酶活性,酶活區(qū)間為2.21-4.44nmol C2H4 h-1m L-1。3、對分離菌株產(chǎn)CMC酶活性研究,以CMC和秸稈分別作為底物,通過二硝基水楊酸法對還原糖生成量進行測定,實驗結(jié)果表明Sn-15、Sn-21、Sn-22、Sn-23、Sn-26具有纖維素水解酶活性,而且當(dāng)?shù)孜锸墙斩挄r纖維素酶活性明顯高于以CMC為底物時的纖維素酶活性。4、對分離菌株產(chǎn)木聚糖酶能力研究,利用DNS顯色法進行測定。結(jié)果表明,Sn-15、Sn-21、Sn-22、Sn-23、Sn-265株菌產(chǎn)木聚糖酶,其中Sn-23、Sn-26兩株鏈霉菌木聚糖酶活性相對較高。5、對分離菌株促生特性進行研究,實驗結(jié)果顯示,Sn-19、Sn-20、Sn-23具有溶磷能力;所有菌株都能產(chǎn)生IAA,Sn-23產(chǎn)量最高;抑菌活性測定結(jié)果顯示,Sn-15、Sn-18、Sn-21、Sn-23、Sn-26在金黃色葡萄球菌作為指示菌株時產(chǎn)生抑菌圈,其中Sn-18抑菌效果最好;Sn-15、Sn-22、Sn-23菌株在以大腸桿菌為指示菌株時抑菌效果明顯,且Sn-22效果最好。6、對分離菌株的羊草促生特性進行研究,分別以中性山地土和鹽堿化草地土進行羊草盆栽實驗,采用菌種為Sn-5和外源堿性菌。實驗結(jié)果表明外源性堿性菌在pH=9,100mmol[Na+]的條件下對羊草生長促生效果最好,山地土盆栽實驗中Sn-5沒有表現(xiàn)出促生作用;在鹽堿化草地土壤盆栽實驗中,Sn-5和外源堿性菌均表現(xiàn)出良好的促生作用。
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S812.2

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