本文關(guān)鍵詞：重組山羊痘病毒通用轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建

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【摘要】：為了便于山羊痘病毒(goat pox virus,GPV)活載體疫苗的研究,本試驗(yàn)擬構(gòu)建能夠用于GPV重組的通用轉(zhuǎn)移載體。用DNA合成和PCR方法構(gòu)建含有啟動(dòng)子p7.5和p11的質(zhì)粒pTKpp,以綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)為報(bào)告基因,構(gòu)建含有p7.5/p11-GFP表達(dá)盒的重組質(zhì)粒pTKpp-GFP和通用轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pTKpgigp,轉(zhuǎn)染已感染GPV的羔羊睪丸(lamb testis,LT)細(xì)胞,觀察GFP的表達(dá)情況;同時(shí)在pTKpgigp中插入外源基因FMDVVP1,構(gòu)建重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pTKpgigp-VP1,與GPV共轉(zhuǎn)染LT細(xì)胞,產(chǎn)生并篩選重組GPV,驗(yàn)證外源基因的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒中的啟動(dòng)子p7.5和p11能夠啟動(dòng)GFP的表達(dá);以重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pTKpgigp-VP1進(jìn)行的GPV重組成功獲得了rGPV。最終證明通用轉(zhuǎn)移載體pTKpgigp構(gòu)建成功,能夠用于重組GPV的相關(guān)研究。
【作者單位】： 寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 山羊痘病毒 轉(zhuǎn)移載體 重組 tk基因
【基金】：寧夏大學(xué)自然科學(xué)研究基金資助項(xiàng)目(ZR1440)
【分類號(hào)】：S852.654
【正文快照】： 隨著DNA重組技術(shù)的深入應(yīng)用,以活病毒作為基因表達(dá)和轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)取得了快速發(fā)展,研究人員先后構(gòu)建了痘苗病毒、禽痘病毒、皰疹病毒、腺病毒和羊痘病毒(good pox virus,GPV)等的活載體,其中痘苗病毒活載體的應(yīng)用最為成熟[1-2]。這些病毒載體用途廣泛,主要集中在以下領(lǐng)域:病毒分子

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1122020