本文關(guān)鍵詞：白絨山羊PPARγ基因RNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建及對(duì)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖分化的影響

  更多相關(guān)文章： 肌內(nèi)脂肪細(xì)胞 RNA干擾 PPARγ

【摘要】：本研究以絨山羊肌內(nèi)脂肪細(xì)胞為試驗(yàn)材料,通過靶向阻斷過氧化物酶體增殖物激活受體PPARγ基因,建立穩(wěn)定干擾的肌內(nèi)脂肪細(xì)胞株,探討絨山羊PPARγ基因在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖和分化過程中的功能。采用慢病毒質(zhì)粒包裝系統(tǒng)構(gòu)建特異靶向白絨山羊PPARγ基因的RNA干擾(RNA interference,RNAi)慢病毒載體,用以建立PPARγ基因穩(wěn)定沉默的肌內(nèi)脂肪細(xì)胞株。利用實(shí)時(shí)定量和Western blot方法檢測(cè)PPARγ基因在干擾組和對(duì)照組不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況,并通過MTT和油紅O染色法研究絨山羊PPARγ基因?qū)?nèi)脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響。經(jīng)測(cè)序證實(shí)合成的含PPARγ-shRNA慢病毒載體寡核苷酸鏈插入正確,對(duì)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的感染效率為80%以上,熒光定量和Western blot檢測(cè)慢病毒介導(dǎo)的shRNA可以有效降低PPARγ的表達(dá),其mRNA和蛋白水平作用的時(shí)間相隔24h。沉默PPARγ基因后,脂肪細(xì)胞內(nèi)甘油三脂的濃度明顯低于對(duì)照組,相反MTT檢測(cè)干擾組中細(xì)胞增殖能力高于對(duì)照組。本研究構(gòu)建了絨山羊shRNA-PPARγ慢病毒干擾載體,成功轉(zhuǎn)染至肌內(nèi)脂肪細(xì)胞后可明顯抑制脂肪細(xì)胞的分化,而促進(jìn)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的增殖,為進(jìn)一步研究PPARγ基因在絨山羊脂肪細(xì)胞代謝通路中的作用及脂肪沉積機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科生殖醫(yī)學(xué)中心;內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院動(dòng)物遺傳育種與繁殖自治區(qū)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肌內(nèi)脂肪細(xì)胞 RNA干擾 PPARγ
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30960246) 內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金(2010Zd11) 國(guó)家科技支撐項(xiàng)目(2011BAD28B05) 國(guó)家絨毛用羊現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-40-05)
【分類號(hào)】：S827
【正文快照】： 肌內(nèi)脂肪(Intramuscular fat,IMF)是脂肪沉積的一種主要形式,具有一般脂肪所具有的特點(diǎn)。肌內(nèi)脂肪直接參與了肉質(zhì)嫩度、風(fēng)味和多汁性的形成[1]。脂肪細(xì)胞是研究脂肪形成的理想模型,體外培養(yǎng)前體脂肪細(xì)胞不僅能完整的認(rèn)識(shí)脂肪組織發(fā)生、增殖和分化的全過程,同時(shí)可以直接觀察各

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1 包麗華;包金寶;;豬肌內(nèi)脂肪的研究進(jìn)展[J];中國(guó)牧業(yè)通訊;2009年01期

2 胡耀華;郭康權(quán);野口剛;佐竹隆顯;;近紅外光譜測(cè)定豬眼肌肌內(nèi)脂肪中脂肪酸含量[J];光譜學(xué)與光譜分析;2009年08期

3 郭添福;蘇州;郭禮榮;黎晶耀;;豬肌內(nèi)脂肪酸成分的研究進(jìn)展[J];畜牧市場(chǎng);2010年01期

4 張宏宇;單安山;徐林;鄭燕斌;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進(jìn)展[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年02期

5 曲桂娟;秦貴信;;肉牛肌內(nèi)脂肪的研究進(jìn)展[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2010年06期

6 郭添福;蘇州;郭禮榮;黎晶耀;;豬肌內(nèi)脂肪酸成分的研究進(jìn)展[J];江西飼料;2010年01期

7 陳亮;黃英;趙素梅;高士爭(zhēng);;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)功能基因的研究進(jìn)展[J];云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年05期

8 董丹萍;馬儷珍;;牛肌內(nèi)脂肪的研究進(jìn)展[J];農(nóng)產(chǎn)品加工;2010年08期

9 譚林;姜海龍;;豬肌內(nèi)脂肪的研究進(jìn)展[J];畜牧與飼料科學(xué);2010年09期

10 王小舟;;豬肌內(nèi)脂肪沉積的影響因素及其研究進(jìn)展[J];中國(guó)豬業(yè);2013年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬現(xiàn)永;林映才;蔣宗勇;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進(jìn)展[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

2 汪秀星;陳杰;劉紅林;;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的差異顯示反轉(zhuǎn)錄PCR鑒定[A];中國(guó)動(dòng)物遺傳育種研究進(jìn)展——第十五次全國(guó)動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

3 王忠剛;朱曉彤;周桂炫;高萍;束剛;江青艷;;豬骨骼肌細(xì)胞對(duì)肌內(nèi)脂肪聚脂和基因表達(dá)的旁分泌調(diào)控[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

4 馬現(xiàn)永;林映才;蔣宗勇;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)豬學(xué)分會(huì)第五次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨養(yǎng)豬業(yè)創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2010年

5 趙素梅;高士爭(zhēng);;豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化過程中脂類相關(guān)基因表達(dá)[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十二次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

6 鄭程莉;徐剛毅;汪代華;;羊肉肌內(nèi)脂肪及影響因素的研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)羊?qū)W分會(huì)全國(guó)養(yǎng)羊生產(chǎn)與學(xué)術(shù)研討會(huì)議論文集[C];2010年

7 汪仕奎;蔣宗勇;林映才;鄭春田;王麗;楊雪芬;高開國(guó);;豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞活性氧代謝及影響機(jī)制探討[A];“生泰爾”杯全國(guó)養(yǎng)豬技術(shù)征文大賽——中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)豬學(xué)分會(huì)五屆三次理事會(huì)暨生豬產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2012年

8 黃愛霞;盧立志;;雞肌內(nèi)脂肪相關(guān)基因的研究進(jìn)展[A];中國(guó)家禽科學(xué)研究進(jìn)展——第十四次全國(guó)家禽科學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

9 胡耀華;郭康權(quán);鈴木孝范;野口剛;河野澄夫;佐竹隆顯;;近紅外光譜測(cè)定袋裝豬眼肌肌內(nèi)脂肪中脂肪酸的研究[A];第十五屆全國(guó)分子光譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)論文集[C];2008年

10 邊連全;王瑞年;楊爽;劉顯軍;孫孝;胡心寬;;肌內(nèi)脂肪對(duì)豬肉品質(zhì)的影響研究[A];第八屆沈陽(yáng)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 胡唯元;畜禽：讓它咋長(zhǎng)就咋長(zhǎng)[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

2 記者 陳鳳來邋通訊員 王貴鎖;2萬父母代變30萬商品豬[N];河北日?qǐng)?bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫文星;二花臉豬皮下與肌內(nèi)脂肪組織基因表達(dá)譜比較及脂肪差異沉積調(diào)控機(jī)制初探[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 姚焰礎(chǔ);蘇尼特羔羊肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化相關(guān)因子和肌內(nèi)脂肪代謝關(guān)鍵酶基因表達(dá)發(fā)育規(guī)律的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

3 廉紅霞;豬肌內(nèi)脂肪代謝信息傳導(dǎo)途徑相關(guān)因子研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

4 陳銀基;不同影響因素條件下牛肉脂肪酸組成變化研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

5 陳其美;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的篩選鑒定及其特征分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 伍婷;豬肌內(nèi)脂肪沉積關(guān)鍵基因的篩選及其新基因pFLJ的功能鑒定[D];浙江大學(xué);2012年

7 伊寶;版納微型豬近交系肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的功能驗(yàn)證[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 崔景香;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的mRNA表達(dá)及功能分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 楊燁;優(yōu)質(zhì)雞肌內(nèi)脂肪代謝調(diào)控及其與肉質(zhì)性狀關(guān)系的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2005年

10 劉作華;日糧能量水平對(duì)豬肌內(nèi)脂肪沉積的影響及作用機(jī)制研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬建爽;沙棘黃酮調(diào)控肉仔雞肌內(nèi)脂肪沉積的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 王紅楊;胚胎期至生長(zhǎng)早期雞肌肉發(fā)育及肌內(nèi)脂肪沉積蛋白質(zhì)組研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 汪秀星;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)調(diào)控基因的分離與鑒定[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

4 田磊磊;脂聯(lián)素在皖南花豬脂肪中的表達(dá)及對(duì)肌內(nèi)脂肪的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 楊海玲;萊蕪豬肌內(nèi)脂肪沉積的生物化學(xué)和組織形態(tài)學(xué)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 劉寧;雞肌內(nèi)脂肪性狀遺傳規(guī)律及基因效應(yīng)的研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

7 郝稱莉;湖羊肌肉肌內(nèi)脂肪相關(guān)基因表達(dá)的發(fā)育性變化及與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 李開楨;利用mRNA差異顯示技術(shù)對(duì)蘇淮白豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)調(diào)控基因的分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

9 陳香凝;黑毛和牛肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分化的基因表達(dá)與肌內(nèi)脂肪性能的關(guān)聯(lián)性研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

10 趙洪波;不同日糧營(yíng)養(yǎng)水平下不同遺傳類型豬體內(nèi)脂肪細(xì)胞發(fā)育和肌內(nèi)脂肪酸組成比較的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：1105230