豬偽狂犬病毒和豬圓環(huán)病毒2型TaqMan-MGB雙重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用
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【摘要】:參照GenBank中豬偽狂犬病毒(PRV)gE基因以及豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)中ORF2特異性序列,設(shè)計(jì)特異引物和TaqMan-MGB探針,通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了同時(shí)檢測(cè)PRV野毒株和豬圓環(huán)病毒(PCV2)的雙重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)方法,并驗(yàn)證該方法的特異性、敏感性、重復(fù)性。結(jié)果表明,該方法檢測(cè)PRV和PCV2靈敏度分別可達(dá)2.23×101、4.5×102拷貝/μL,均比常規(guī)PCR檢測(cè)方法高100倍;同時(shí)檢測(cè)豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖和呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬細(xì)小病毒(PPV)、均為陰性,無(wú)交叉反應(yīng);對(duì)30份疑似病料進(jìn)行檢測(cè)并與普通PCR進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,二者檢測(cè)PRV的總符合率為96.67%,檢測(cè)PCV2的總符合率為93.33%。本試驗(yàn)建立的TaqMan-MGB雙重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)方法可同時(shí)對(duì)PRV野毒株和PCV2進(jìn)行早期快速診斷,可應(yīng)用于病原學(xué)監(jiān)測(cè),流行病學(xué)調(diào)查等。
【作者單位】: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;福建省畜禽疫病防治工程技術(shù)研究中心;福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 豬偽狂犬病毒 豬圓環(huán)病毒TaqMan-MGB 雙重?zé)晒舛縋CR
【基金】:福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年科技人才創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(2010QC-13) 省農(nóng)業(yè)科學(xué)院重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(ZDZX-1302)
【分類號(hào)】:S852.651
【正文快照】: 福州350013)*Corresponding author,E-mail:chensy58@163.com豬偽狂犬病毒(pseudorabiesvirus,PRV)可引起豬多種急性傳染病,以發(fā)熱和腦脊髓炎為主要特征,新生仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,妊娠母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等[1-2]。成年豬呈現(xiàn)典型的潛伏感染且終生帶毒,一定條件下潛伏
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,本文編號(hào):1085490
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