本文關(guān)鍵詞：水溶性酵母葡聚糖口服液的研究

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【摘要】：酵母菌含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì),在酵母菌中,發(fā)揮免疫活性的物質(zhì)是酵母菌細胞壁中的葡聚糖,其還具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等生物活性。本文通過對酵母菌進行提取工藝和分子修飾工藝的篩選,制備出9個的硫酸化酵母葡聚糖(s GSC),通過體內(nèi)、體外活性的篩選,得到活性較好葡聚糖,然后將其制備成口服液并進行穩(wěn)定性的研究,全文的結(jié)論如下:1.通過預(yù)實驗,選出了鹽析法與堿法結(jié)合的提取方法,以糖含量為實驗指標,對鹽溶液的濃度(A)、反應(yīng)時間(B)和溫度(C)三因素進行了L9(34)正交設(shè)計,通過直觀分析得出RARBRCR;在方差分析中,FA,FC均大于F0.95(2,2),表明因子A與因子C在顯著性水平0.05上差異顯著;FBF0.90(2,2),表明因子B差異不顯著。因此,選擇酵母葡聚糖的最佳提取工藝組合為A3B3C1。2.以濃硫酸的濃度和反應(yīng)時間為影響因素進行兩因素的試驗,制備了9個s GSC,在DPPH和羥自由基的清除實驗中,隨著葡聚糖濃度的增加,自由基的清除率逐漸增加,最高分別達到92.52%和83.41%,其中對DPPH自由基的清除率順序依次為769285134;對羥自由基的清除活性依次為67923451。在超氧化物自由基的清除實驗中,各產(chǎn)物的清除率均偏低,且清除率與葡聚糖濃度沒有明顯的線性關(guān)系,初步篩選出三個抗氧化活性較好的產(chǎn)物。3.將三個s GSC進行體內(nèi)抗氧化及免疫增強活性評價,并研究其活性與分子量和取代度之間的關(guān)系。在體內(nèi)抗氧化實驗中,各實驗組的超氧化物歧化酶(SOD)活性與對照組并沒有顯著差異(p0.05);s GSC1組的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性顯著高于對照組(p0.05);s GSC1和s GSC2組的過氧化氫酶(CAT)活性顯著高于s GSC3組和對照組(p0.05);三個s GSC組的丙二醛(MDA)活性明顯低于對照組(p0.05)�？寡趸钚皂樞驗閟 GSC1s GSC2s GSC3,s GSC1,s GSC2和s GSC3的取代度和分子量分別為0.16,12.9k Da;0.24,16.5k Da和0.27,19.2k Da。表明隨著分子量和取代度的增加,其抗氧化活性逐漸降低。在免疫增強實驗中,各實驗組的脾臟和胸腺臟器指數(shù)與對照組差異顯著(p0.05);在淋巴細胞增殖實驗中,s GSC1和s GSC2組的A570值顯著高于其他組(p0.05),與對照組相比,三個s GSC組的CD4+細胞數(shù)顯著升高,CD8+細胞數(shù)顯著降低,兩種細胞的比率顯著升高(p0.05);三個s GSC組的IL-2和IFN-γ濃度顯著高于對照組(p0.05)。綜合結(jié)果比較低分子量和取代度的s GSC1的免疫增強結(jié)果最好。4.制備三批口服液樣品,通過光照實驗和加速實驗對樣品進行穩(wěn)定性評價,在光照實驗中,在第5天和第10天時三批樣品的糖含量均比第0天的值偏小,表明該口服液對光照不穩(wěn)定。在加速實驗中,三批樣品的的各項指標在第0、1、2、3和6個月之間沒有顯著的變化,表明制備的葡聚糖口服液樣品具有較好的穩(wěn)定性。綜上所述,本文篩選出了s GSC的提取條件和分子修飾條件,并對其生物活性進行了評價;將s GSC制備成口服液并對其穩(wěn)定性進行研究,光照實驗表明該口服液對光不穩(wěn)定,需用棕色瓶子避光保存,加速實驗表明該口服液具有較好的穩(wěn)定性。
【關(guān)鍵詞】：葡聚糖 硫酸化修飾 抗氧化活性 免疫增強活性 穩(wěn)定性研究
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S859.79
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-15
• 英文縮略表15-16
• 第一章 引言16-24
• 1.1 酵母菌16-17
• 1.2 酵母葡聚糖17
• 1.3 葡聚糖的生物活性17-19
• 1.3.1 免疫增強17-18
• 1.3.2 抗病毒活性18
• 1.3.3 抗腫瘤活性18-19
• 1.3.4 抗氧化活性19
• 1.4 酵母葡聚糖的提取19-21
• 1.5 葡聚糖的修飾21-22
• 1.6 葡聚糖的制劑類型22
• 1.7 研究的目的、意義和主要內(nèi)容22-24
• 1.7.1 研究的目的和意義22
• 1.7.2 研究的主要內(nèi)容22-24
• 第二章 酵母葡聚糖的提取24-33
• 2.1 引言24
• 2.2 材料與方法24-27
• 2.2.1 試劑24
• 2.2.2 儀器24-25
• 2.2.3 提取方法25-26
• 2.2.4 苯酚-硫酸法測定糖含量26
• 2.2.5 鹽析堿法提取樣品26-27
• 2.2.6 正交試驗設(shè)計27
• 2.2.7 數(shù)據(jù)分析27
• 2.3 結(jié)果27-32
• 2.3.1 標準曲線的繪制27-28
• 2.3.2 精密度實驗28
• 2.3.3 穩(wěn)定性實驗28-29
• 2.3.4 加樣回收率實驗29
• 2.3.5 預(yù)實驗結(jié)果29-30
• 2.3.6 酵母葡聚糖提取工藝30-32
• 2.4 討論32
• 2.5 小結(jié)32-33
• 第三章 酵母葡聚糖的分子結(jié)構(gòu)修飾33-42
• 3.1 引言33
• 3.2 材料33-34
• 3.2.1 試劑33
• 3.2.2 儀器33-34
• 3.3 方法34-36
• 3.3.1 硫酸化修飾34
• 3.3.2 取代度（DS）的測定34-35
• 3.3.3 DPPH自由基清除率測定35
• 3.3.4 超氧化物自由基清除率測定35-36
• 3.3.5 羥自由基清除率測定36
• 3.4 結(jié)果36-40
• 3.4.1 標準曲線的繪制36-37
• 3.4.2 兩因素實驗設(shè)計37
• 3.4.3 體外抗氧化活性37-40
• 3.5 討論40-41
• 3.6 小結(jié)41-42
• 第四章 硫酸化酵母葡聚糖體內(nèi)抗氧化及免疫增強活性42-55
• 4.1 引言42
• 4.2 材料42-43
• 4.2.1 試劑42-43
• 4.2.2 儀器43
• 4.3 方法43-45
• 4.3.1 樣品的制備43
• 4.3.2 取代度的測定43
• 4.3.3 分子量的測定43-44
• 4.3.4 傅里葉紅外光譜測定44
• 4.3.5 動物實驗44
• 4.3.6 臟器指數(shù)44
• 4.3.7 生化試驗44
• 4.3.8 淋巴細胞增殖實驗44-45
• 4.3.9 CD4~+和CD8~+T淋巴細胞的測定45
• 4.3.10 血清IL-2 和IFN-γ45
• 4.4 數(shù)據(jù)分析45
• 4.5 結(jié)果45-53
• 4.5.1 化學(xué)分析45-46
• 4.5.2 動物實驗46-53
• 4.6 討論53-54
• 4.7 小結(jié)54-55
• 第五章 口服液的制備及穩(wěn)定性研究55-60
• 5.1 引言55
• 5.2 材料55-56
• 5.2.1 試劑55
• 5.2.2 儀器55-56
• 5.3 方法56
• 5.3.1 葡聚糖口服液的制備56
• 5.3.2 糖含量的測定56
• 5.3.3 取代度的測定56
• 5.3.4 分子量的測定56
• 5.3.5 相對密度及PH的測定56
• 5.3.6 光照穩(wěn)定性56
• 5.3.7 加速實驗56
• 5.4 結(jié)果56-59
• 5.4.1 光照穩(wěn)定性結(jié)果56-57
• 5.4.2 加速實驗結(jié)果57-59
• 5.5 討論59
• 5.6 小結(jié)59-60
• 第六章 全文結(jié)論60-61
• 參考文獻61-67
• 致謝67-68
• 作者簡歷68

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本文編號：1064326