發(fā)布時間：2017-10-18 05:35

  本文關鍵詞：進口胎牛血清中牛病毒性腹瀉病毒的分離及鑒定

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【摘要】：目的對進口胎牛血清中的牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)進行分離及鑒定。方法Trizol法提取待檢胎牛血清中的病毒RNA后,利用套式RT-PCR擴增BVDV,并利用生物信息學Lasergene 7.0軟件對其核苷酸序列進行同源性分析。取生長狀態(tài)良好的MDBK細胞,按1%比例加入待檢胎牛血清,收獲F1代BVDV FBS2014,反復凍融3次后,再次接種MDBK細胞,連傳4代。采用熒光定量RT-PCR法、間接免疫熒光試驗及抗原捕獲ELISA法對收獲的病毒進行鑒定。結果擴增產物大小均與預期相符,與已報道的BVDV-1 NADL株的核苷酸序列一致性為92.2%,屬于BVDV-1a亞型毒株;分離的病毒經鑒定為BVDV,命名為BVDV FBS2014,病毒基因拷貝數(shù)為10~4拷貝/μl,感染MDBK細胞可見特異性綠色熒光;各代次的病毒收獲液中BVDV的基因拷貝數(shù)均大于10~(4.92)拷貝/μl,BVDV抗原檢測結果均為陽性。結論購買的進口胎牛血清中成功分離到可致MDBK細胞產生細胞病變的病毒,經鑒定所分離的病毒為BVDV,命名為FBS2014株,該病毒屬于BVDV-1a亞型毒株。
【作者單位】： 吉林農業(yè)大學;中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術國家重點實驗室;
【關鍵詞】： 牛病毒性腹瀉病毒 胎牛血清 分離 鑒定
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 牛病毒性腹瀉是由牛病毒性腹瀉病毒(bovineviral diarrhea virus,BVDV)引起的,臨床上以牛黏膜發(fā)炎、糜爛、壞死以及腹瀉為特征的疾病[1]。BVDV屬于黃病毒科(Flaviviridae)瘟病毒屬(Pestivirus),與豬瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)和綿羊邊界病毒(border disease vi

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本文編號：1053233