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蛋雞感染基因Ⅶ型NDV后輸卵管組織中主要細胞因子及趨化因子mRNA的表達變化

發(fā)布時間:2017-10-16 05:40

  本文關(guān)鍵詞:蛋雞感染基因Ⅶ型NDV后輸卵管組織中主要細胞因子及趨化因子mRNA的表達變化


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【摘要】:新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的禽類一種高度接觸性傳染病,在家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。NDV感染產(chǎn)蛋雞能造成輸卵管充血,出血,引起輸卵管的炎癥,從而導(dǎo)致蛋雞輸卵管的機能障礙。新城疫發(fā)病蛋雞群產(chǎn)蛋率降低40%-60%,產(chǎn)軟殼蛋,沙殼蛋的的幾率增加;騐II型NDV是在亞洲地區(qū)流行的主要基因型,有關(guān)基因VII型NDV病原學(xué)特點的研究很多,但有關(guān)NDV感染蛋雞后輸卵管組織中與炎癥相關(guān)的細胞因子及趨化因子的表達研究很少。因此,本研究主要檢測NDV感染產(chǎn)蛋雞后輸卵管組織中細胞因子和趨化因子的表達,為NDV感染導(dǎo)致蛋雞輸卵管損傷的分子機理研究提供實驗數(shù)據(jù)。實驗結(jié)果如下:1.用基因VII型NDV人工感染非免健康蛋雞,感染后觀察發(fā)病情況和臨床癥狀,感染后不同時間撲殺病雞,分別采取輸卵管傘部、膨大部、峽部、子宮部和陰道部組織用于進一步檢測。HN蛋白切片染色證明,NDV病毒能在輸卵管各部位復(fù)制,5個部位HN蛋白染色都呈陽性。病毒在傘部、膨大部、峽部感染的細胞主要是固有層腺上皮細胞,零星的感染粘膜下層細胞。在子宮部,病毒主要感染粘膜下層細胞,零星感染固有層細胞。在陰道部病毒主要感染粘膜上皮細胞。2.采用Real-time RT-PCR檢測輸卵管膨大部和子宮部細胞因子IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-α,IFN-βm RNA和趨化因子CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在不同感染時間的表達變化。IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-βm RNA基因在輸卵管膨大部和子宮部出現(xiàn)了不同程度的上調(diào),IL-2在膨大部上調(diào)的倍數(shù)最高,為正常的137倍,IFN-β上調(diào)倍數(shù)為95倍,IL-1β上調(diào)了16倍,而IFN-α基因表達出現(xiàn)下調(diào)的趨勢。CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在2個部位都表現(xiàn)出上調(diào)的趨勢,且膨大部的上調(diào)趨勢最明顯。綜上所述,基因VII型NDV感染非免蛋雞后病毒能在輸卵管組織組織中復(fù)制,引起輸卵管組織炎性因子釋放和嚴重病理損傷。
【關(guān)鍵詞】:基因VII型NDV 輸卵管組織 HN蛋白 細胞因子 趨化因子 蛋雞
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S858.31
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • ABSTRACT5-9
  • 文獻綜述9-13
  • 第一章 新城疫病毒誘導(dǎo)機體免疫反應(yīng)的研究進展9-13
  • 1.1 新城疫病毒的概述9-10
  • 1.1.1 病原學(xué)9-10
  • 1.1.2 臨床癥狀及其病理變化10
  • 1.2 NDV誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答10-12
  • 1.2.1 NDV感染誘導(dǎo)的先天免疫應(yīng)答10-11
  • 1.2.2 NDV誘導(dǎo)的抗體反應(yīng)11
  • 1.2.3 NDV誘導(dǎo)的細胞免疫11-12
  • 1.3 NDV對蛋雞輸卵管的致病作用12
  • 1.4 本研究的目的及意義12-13
  • 試驗研究13-21
  • 第二章 蛋雞感染基因VII型NDV后輸卵管組織中主要細胞因子及趨化因子MRNA的表達變化13-21
  • 2.1 材料13-14
  • 2.1.1 毒株13
  • 2.1.2 試驗動物13
  • 2.1.3 主要試劑13-14
  • 2.1.4 主要儀器14
  • 2.2 方法14-16
  • 2.2.1 NDV 增殖及 EID50 測定14
  • 2.2.2 蛋雞人工感染基因VII型NDV臨床癥狀觀察14
  • 2.2.3 新城疫感染雞后輸卵管組織中病毒的檢測14-15
  • 2.2.4 Real-time RT-PCR15-16
  • 2.3 結(jié)果16-19
  • 2.3.1 感染蛋雞臨床癥狀及病變觀察16
  • 2.3.2 新城疫病毒在輸卵管的分布情況16-17
  • 2.3.3 細胞因子IL-2,IL-6,,IL-1β,IFN-α,IFN-β 基因在輸卵管膨大部和子宮部表達變化17-18
  • 2.3.4 趨化因子基因CXCLi1,CXCLi2, CCR5在膨大部和子宮部的表達變化18-19
  • 2.4 討論19-20
  • 2.5 小結(jié)20-21
  • 結(jié)論21-22
  • 參考文獻22-26
  • 致謝26-27
  • 作者簡介27

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本文編號:1040940

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