本文關(guān)鍵詞：蛋雞感染基因Ⅶ型NDV后輸卵管組織中主要細(xì)胞因子及趨化因子mRNA的表達(dá)變化

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【摘要】：新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的禽類一種高度接觸性傳染病,在家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。NDV感染產(chǎn)蛋雞能造成輸卵管充血,出血,引起輸卵管的炎癥,從而導(dǎo)致蛋雞輸卵管的機(jī)能障礙。新城疫發(fā)病蛋雞群產(chǎn)蛋率降低40%-60%,產(chǎn)軟殼蛋,沙殼蛋的的幾率增加�；騐II型NDV是在亞洲地區(qū)流行的主要基因型,有關(guān)基因VII型NDV病原學(xué)特點(diǎn)的研究很多,但有關(guān)NDV感染蛋雞后輸卵管組織中與炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子及趨化因子的表達(dá)研究很少。因此,本研究主要檢測(cè)NDV感染產(chǎn)蛋雞后輸卵管組織中細(xì)胞因子和趨化因子的表達(dá),為NDV感染導(dǎo)致蛋雞輸卵管損傷的分子機(jī)理研究提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.用基因VII型NDV人工感染非免健康蛋雞,感染后觀察發(fā)病情況和臨床癥狀,感染后不同時(shí)間撲殺病雞,分別采取輸卵管傘部、膨大部、峽部、子宮部和陰道部組織用于進(jìn)一步檢測(cè)。HN蛋白切片染色證明,NDV病毒能在輸卵管各部位復(fù)制,5個(gè)部位HN蛋白染色都呈陽性。病毒在傘部、膨大部、峽部感染的細(xì)胞主要是固有層腺上皮細(xì)胞,零星的感染粘膜下層細(xì)胞。在子宮部,病毒主要感染粘膜下層細(xì)胞,零星感染固有層細(xì)胞。在陰道部病毒主要感染粘膜上皮細(xì)胞。2.采用Real-time RT-PCR檢測(cè)輸卵管膨大部和子宮部細(xì)胞因子IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-α,IFN-βm RNA和趨化因子CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在不同感染時(shí)間的表達(dá)變化。IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-βm RNA基因在輸卵管膨大部和子宮部出現(xiàn)了不同程度的上調(diào),IL-2在膨大部上調(diào)的倍數(shù)最高,為正常的137倍,IFN-β上調(diào)倍數(shù)為95倍,IL-1β上調(diào)了16倍,而IFN-α基因表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)的趨勢(shì)。CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在2個(gè)部位都表現(xiàn)出上調(diào)的趨勢(shì),且膨大部的上調(diào)趨勢(shì)最明顯。綜上所述,基因VII型NDV感染非免蛋雞后病毒能在輸卵管組織組織中復(fù)制,引起輸卵管組織炎性因子釋放和嚴(yán)重病理損傷。
【關(guān)鍵詞】：基因VII型NDV 輸卵管組織 HN蛋白 細(xì)胞因子 趨化因子 蛋雞
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.31
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 文獻(xiàn)綜述9-13
• 第一章 新城疫病毒誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)的研究進(jìn)展9-13
• 1.1 新城疫病毒的概述9-10
• 1.1.1 病原學(xué)9-10
• 1.1.2 臨床癥狀及其病理變化10
• 1.2 NDV誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答10-12
• 1.2.1 NDV感染誘導(dǎo)的先天免疫應(yīng)答10-11
• 1.2.2 NDV誘導(dǎo)的抗體反應(yīng)11
• 1.2.3 NDV誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫11-12
• 1.3 NDV對(duì)蛋雞輸卵管的致病作用12
• 1.4 本研究的目的及意義12-13
• 試驗(yàn)研究13-21
• 第二章 蛋雞感染基因VII型NDV后輸卵管組織中主要細(xì)胞因子及趨化因子MRNA的表達(dá)變化13-21
• 2.1 材料13-14
• 2.1.1 毒株13
• 2.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物13
• 2.1.3 主要試劑13-14
• 2.1.4 主要儀器14
• 2.2 方法14-16
• 2.2.1 NDV 增殖及 EID50 測(cè)定14
• 2.2.2 蛋雞人工感染基因VII型NDV臨床癥狀觀察14
• 2.2.3 新城疫感染雞后輸卵管組織中病毒的檢測(cè)14-15
• 2.2.4 Real-time RT-PCR15-16
• 2.3 結(jié)果16-19
• 2.3.1 感染蛋雞臨床癥狀及病變觀察16
• 2.3.2 新城疫病毒在輸卵管的分布情況16-17
• 2.3.3 細(xì)胞因子IL-2，IL-6，，IL-1β，IFN-α，IFN-β 基因在輸卵管膨大部和子宮部表達(dá)變化17-18
• 2.3.4 趨化因子基因CXCLi1，CXCLi2， CCR5在膨大部和子宮部的表達(dá)變化18-19
• 2.4 討論19-20
• 2.5 小結(jié)20-21
• 結(jié)論21-22
• 參考文獻(xiàn)22-26
• 致謝26-27
• 作者簡(jiǎn)介27

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本文編號(hào)：1040940