本文關(guān)鍵詞：荷斯坦奶牛乳腺組織凍存及乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)技術(shù)改進(jìn)

  更多相關(guān)文章： 乳腺上皮細(xì)胞 側(cè)置處理 組織凍存 原代培養(yǎng) 奶牛

【摘要】：為了改進(jìn)奶牛乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)技術(shù)和探究乳腺組織凍存方法,選用24月齡無(wú)泌乳史荷斯坦奶牛,采用組織塊種植法,通過(guò)側(cè)置和倒置兩種方式,分別從新鮮和凍存(8個(gè)月)的乳腺組織中分離培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞。結(jié)果表明,側(cè)置處理能使乳腺細(xì)胞爬出時(shí)間縮短1~2d,并改善組織塊貼壁速度和效果;回收于前次培養(yǎng)后的乳腺組織塊再分離培養(yǎng),貼壁第2天即有乳腺上皮細(xì)胞爬出;一步冷凍(-80℃)液氮保存較大奶牛乳腺組織塊,凍存液A(FBS∶DMSO∶DMEM/F12=7∶2∶1)凍存的組織塊存活率為50%,凍存液B(FBS∶DMEM/F12∶DMSO∶HEPES/丙酮酸鈉貯存液=10∶7∶2∶1)凍存的組織塊存活率為56%�？梢�(jiàn),作者建立的側(cè)置處理法和組織塊回收法可以用于奶牛乳腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng),可以縮短組織塊種植法實(shí)驗(yàn)周期,凍存液中加入緩沖液HEPES/丙酮酸鈉后有利于組織塊生物活性保持。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所甘肅省中獸藥工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 乳腺上皮細(xì)胞 側(cè)置處理 組織凍存 原代培養(yǎng) 奶牛
【基金】：國(guó)家奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS37) 公益性行業(yè)專(zhuān)項(xiàng)(20130304)
【分類(lèi)號(hào)】：S823
【正文快照】： 體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞適宜建立細(xì)胞模型,是開(kāi)展生理、病理、藥理等研究的重要實(shí)驗(yàn)材料。國(guó)外已有成熟永生化奶牛乳腺上皮細(xì)胞系,如MAC-T、BME-UV1[1-2]。國(guó)內(nèi)也有永生化奶牛乳腺細(xì)胞系研究的報(bào)道,如朱佳杰、李吉霞、上官陶、代瑞等通過(guò)轉(zhuǎn)染hTert、SV40T等獲得永生化乳腺

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 陳亞冰;符梅;蘭道亮;林寶山;黃Pr;李鍵;;牦牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)及鑒定[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2015年01期

2 上官陶;王洪梅;馮敏燕;仲躋峰;何洪彬;;表達(dá)hTERT及SV40T永生化奶牛乳腺上皮細(xì)胞系的建立[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年02期

3 ;Microarray analysis of gene expression profiles in the bovine mammary gland during lactation[J];Science China(Life Sciences);2010年02期

4 孫蘇軍,安志興,彭新榮,張涌;山羊乳腺組織塊冷凍保存試驗(yàn)[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年04期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王立娜;氨基酸與STAT5A基因互作對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳的調(diào)節(jié)作用及機(jī)理[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

2 劉明江;咖啡酸抗LPS誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎性損傷作用及其分子機(jī)制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 李吉霞;牛乳腺上皮細(xì)胞永生化及其多能性的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 代瑞;奶山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞系的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

2 朱佳杰;沼澤型水牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系建立及永生化研究[D];廣西大學(xué);2008年

3 王治國(guó);奶牛乳腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及應(yīng)用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2007年

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 林杰;王旭榮;王磊;張景艷;王學(xué)智;孟嘉仁;楊志強(qiáng);李建喜;;荷斯坦奶牛乳腺組織凍存及乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)技術(shù)改進(jìn)[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2016年05期

2 林杰;王旭榮;李建喜;王孝武;楊志強(qiáng);;奶牛乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)、純化及鑒定技術(shù)研究進(jìn)展[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2015年08期

3 周苗苗;崔景香;;奶牛乳腺體外培養(yǎng)模型應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中國(guó)奶牛;2014年14期

4 胡紅柳;侯曉明;曲波;高學(xué)軍;李慶章;;高通量基因表達(dá)譜的應(yīng)用[J];中國(guó)乳品工業(yè);2012年12期

5 張艷麗;蔣澄宇;;改革中的《中國(guó)科學(xué)·生命科學(xué)》——《中國(guó)科學(xué)·生命科學(xué)》2010～2011年進(jìn)展回顧[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2012年11期

6 葛秀國(guó);李吉霞;丁向彬;劉新峰;郭宏;;牛乳腺組織的冷凍保存及乳腺細(xì)胞的分離[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2011年05期

7 ;Gene Expression Patterns in Different Wool Densities of Rex Rabbit Using cDNA Microarray[J];Agricultural Sciences in China;2011年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周錦華;永生化山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞系的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 朝格圖;奶牛乳腺上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)與鑒定[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 梁夢(mèng)瑤;FABP3基因在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中的功能研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 湯明惠;甘氨酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖、凋亡及免疫因子基因表達(dá)影響的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 代瑞;奶山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞系的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

6 趙是鈞;復(fù)方中草藥提取物對(duì)小鼠乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響及其臨床應(yīng)用[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 陳海燕;兩種不同日糧類(lèi)型對(duì)泌乳奶牛乳腺脂肪酸代謝的影響[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 韓亞南;不同培養(yǎng)代數(shù)及葡萄糖、氨基酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白基因表達(dá)的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

9 郝明超;牦牛乳腺上皮細(xì)胞系的建立與生物學(xué)特性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

10 蘆春艷;奶牛乳腺上皮細(xì)胞系的建立及DGAT1基因功能的驗(yàn)證[D];吉林大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 崔新潔;胡慶亮;李奕平;陶琳;修磊;劉秉春;陳媛;王瀟;;金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)牛原代乳腺上皮細(xì)胞的凋亡[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年15期

2 王楨;羅軍;王偉;趙旺生;林先滋;;奶山羊乳腺上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J];生物工程學(xué)報(bào);2010年08期

3 陳建暉;佟慧麗;李慶章;高學(xué)軍;;奶牛乳腺上皮細(xì)胞系的建立[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年05期

4 龐龍,王燕蓉,沈新生,張崇智;小鼠卵巢組織的超速凍存法研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2002年03期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 敬曉棋;乳腺炎細(xì)胞因子及T淋巴細(xì)胞亞群研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

2 宋楠;大鼠氣管干細(xì)胞增殖分化過(guò)程中Oct3/4、Nanog和Sox2的表達(dá)及意義[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

3 張U，

本文編號(hào)：1026372