本文關鍵詞：豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬A型輪狀病毒多重RT-PCR方法的建立及其應用

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【摘要】：為了建立一種能夠同時檢測豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬A群輪狀病毒(RVA)的敏感、特異的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本試驗分別針對PEDV和TGEV的N基因、RVA的VP7基因設計了4對引物(其中針對PEDV N基因的引物為內(nèi)、外2對),結合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRTPCR),建立了檢測PEDV、TGEV和RVA的mRT-PCR方法。mRT-PCR能夠同時擴增出針對3種病毒的預期大小的目的核苷酸片段,與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟病毒、偽狂犬病毒及豬圓環(huán)病毒2型等病毒無交叉反應;可以檢測到PEDV、TGEV和RVA的最低核酸濃度分別為16.07、803.9和321.5μg/L。應用mRT-PCR檢測了31份腹瀉仔豬的血清、肛拭子或小腸組織,其中PEDV、TGEV與RVA的陽性率分別為61.29%、6.45%和25.81%,并檢測到了PEDV與RVA或TGEV雙重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的樣品。在檢測臨床樣品時,mRT-PCR和單項RT-PCR檢出PEDV、TGEV和RVA的符合率分別為96.77%、93.54%和93.54%。上述結果表明,mRTPCR能夠快速鑒別檢測PEDV、TGEV和RVA 3種病毒,PEDV是引起當前仔豬腹瀉的主要病原。
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院;
【關鍵詞】： 豬流行性腹瀉病毒 豬傳染性胃腸炎病毒 豬A群輪狀病毒 多重RT-PCR
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31372441) 河北省科技計劃資助項目(13226603D-1(2013)-X) 河北省生豬產(chǎn)業(yè)技術體系疫病控制專項資助項目
【分類號】：S852.65
【正文快照】： Establishment and application of a multiplex reverse transcription-PCR for detec-ting porcine epidemic diarrhea virus,porcine transmissible gastroenteritis virusand porcine group A rotavirusLI Li-min,ZHU Wei-xia,WANG Xiao-bo,WEI Yan-qiu,ZHANG He,ZHANG Yi

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7 張U，

本文編號：1015897