四種消毒劑對(duì)豬場(chǎng)常見病原微生物的殺滅效果研究
本文關(guān)鍵詞:四種消毒劑對(duì)豬場(chǎng)常見病原微生物的殺滅效果研究
更多相關(guān)文章: 消毒 細(xì)菌 病毒 消毒劑 殺滅效果
【摘要】:隨著養(yǎng)豬業(yè)的快速發(fā)展,規(guī)模化程度不斷提高,在提高了養(yǎng)殖效益的同時(shí),疫病的多發(fā)也成為困擾養(yǎng)豬場(chǎng)的重要問題。及時(shí)確定引起疫病的病原,并采取有效的生物安全措施是規(guī);i場(chǎng)疫病防控的主要工作,消毒是一項(xiàng)經(jīng)常性和基礎(chǔ)性的生物安全措施,選取有效的消毒劑和作用方式,是保證消毒效果的關(guān)鍵。本研究在某規(guī);i場(chǎng)發(fā)生的一起仔豬腹瀉病原的分離鑒定、疫情撲滅的基礎(chǔ)上選取生產(chǎn)中常用的四種消毒劑,在實(shí)驗(yàn)條件下研究其對(duì)大腸埃希菌、志賀菌、鏈球菌、金黃色葡萄球菌和偽狂犬病病毒等豬場(chǎng)常見病原的殺滅作用。取得以下結(jié)果:1.在排除仔豬腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)引起的基礎(chǔ)上,從患病豬肝臟中分離獲得一株革蘭氏陰性細(xì)菌,經(jīng)生化試驗(yàn)和16s rRNA基因序列分析,確定其為大腸埃希菌;分離菌對(duì)頭孢類抗生素高度敏感,對(duì)氧氟沙星類抗菌藥物中度敏感,對(duì)氨芐西林?鏈霉素?哌拉西林等藥物不敏感;經(jīng)對(duì)病豬用敏感藥物治療和環(huán)境消毒,本次疫情得以撲滅。2.分別選取戊二醛-癸甲溴銨、溴化二甲基二癸基烴銨、過硫酸氫鉀和次氯酸鈉為候選消毒劑,大腸埃希菌、志賀菌、金黃色葡萄球和鏈球菌為目標(biāo)菌,研究不同條件下各種消毒劑的最佳使用方法。(1)有效中和劑的選擇在中和劑對(duì)細(xì)菌無明顯影響的前提下,確定各種消毒劑的中和劑分別為:戊二醛-癸甲溴銨(500 mg/L)的中和劑為吐溫-80(3 000 mg/L)+甘氨酸(1000mg/L);溴化二甲基二癸基烴銨(250 mg/L)的中和劑為吐溫-80(3000 mg/L)+卵磷脂(300 mg/L);過硫酸氫鉀(2 500 mg/L)的中和劑為硫代硫酸鈉(300 mg/L);次氯酸鈉(275 mg/L)的中和劑為硫代硫酸鈉(300 mg/L)。(2)對(duì)大腸埃希菌有效殺滅作用條件在無蛋白干擾物的條件下:戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(31.25 mg/L)、過硫酸氫鉀(312.5 mg/L)、次氯酸鈉(138 mg/L)對(duì)大腸埃希菌(1.57×107cfu)的完全殺滅條件為:37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干擾物時(shí):(1)有機(jī)物濃度為3%時(shí):戊二醛-癸甲溴銨(250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(62.5 mg/L)、過硫酸氫鉀(312.5 mg/L),次氯酸鈉(138 mg/L)對(duì)大腸埃希菌(1.57×107 cfu)的完全殺滅條件為:25℃作用10 min。(2)有機(jī)物濃度為25%時(shí),戊二醛-癸甲溴銨(1000 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(125 mg/L)、過硫酸氫鉀(625 mg/L)、次氯酸鈉(690 mg/L)對(duì)大腸埃希菌(1.57×107 cfu)的完全殺滅條件為:25℃作用10 min。(3)對(duì)金黃色葡萄球菌的有效殺滅條件在無蛋白干擾物的條件下:戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(31.25 mg/L)、過硫酸氫鉀(312.5 mg/L)、次氯酸鈉(138 mg/L)對(duì)金黃色葡萄球菌(2.15×107 cfu)的完全殺滅條件為:在37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干擾物時(shí):(1)有機(jī)物濃度為3%時(shí):戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(125 mg/L)、過硫酸氫鉀(1250 mg/L)、次氯酸鈉(276 mg/L)對(duì)金黃色葡萄球菌(2.15×107)的完全殺滅條件為:在25℃作用10 min。(2)有機(jī)物濃度為25%時(shí):戊二醛-癸甲溴銨(1250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(250 mg/L)、過硫酸氫鉀(2500 mg/L)、次氯酸鈉(1104 mg/L)對(duì)金黃色葡萄球菌(2.15×107 cfu)的完全殺滅條件為:在25℃作用10 min。(4)對(duì)志賀菌的有效殺滅條件在無蛋白干擾物時(shí):戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(31.25mg/L)、過硫酸氫鉀(312.5 mg/L)、次氯酸鈉(138 mg/L)對(duì)志賀氏菌(1.24×107 cfu)的完全殺滅條件為:在37℃、25℃、4℃作用5 min。(5)對(duì)鏈球菌的有效殺滅條件在無蛋白干擾物的條件下:戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(31.25 mg/L)、過硫酸氫鉀(6250 mg/L)、次氯酸鈉(138 mg/L)對(duì)鏈球菌(1.2×107cfu)的完全殺滅條件為:在37℃、25℃、4℃作用5 min。3.戊二醛-癸甲溴銨對(duì)偽狂犬病病毒的有效殺滅條件戊二醛-癸甲溴銨(125 mg/L)有效中和劑為甘氨酸(3000 mg/L),此劑量消毒劑和中和劑均對(duì)PK15細(xì)胞生長無影響;對(duì)108.1TCID50的偽狂犬病病毒最佳殺滅條件為25℃作用30 min。在對(duì)豬場(chǎng)環(huán)境進(jìn)行消毒殺滅病原時(shí),四種消毒劑使用推薦作用條件為:戊二醛-癸甲溴銨(1250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烴銨(250 mg/L)、過硫酸氫鉀(2500 mg/L、)次氯酸鈉(1104 mg/L),室溫條件下(25℃),作用不少于10 min。
【關(guān)鍵詞】:消毒 細(xì)菌 病毒 消毒劑 殺滅效果
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S858.28
【目錄】:
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-14
- 文獻(xiàn)綜述14-22
- 第一章 豬場(chǎng)常見病原微生物及消毒防控14-22
- 1.1 規(guī);i場(chǎng)常見病原微生物及衛(wèi)生處理14-18
- 1.1.1 常見細(xì)菌性病原的衛(wèi)生處理14-16
- 1.1.2 豬場(chǎng)常見病毒性病原及其衛(wèi)生處理16-18
- 1.2 消毒在規(guī);i場(chǎng)疫病防控中的作用18-19
- 1.2.1 消毒重要意義18
- 1.2.2 豬場(chǎng)常用的消毒方法18-19
- 1.2.3 化學(xué)消毒劑的使用與選擇19
- 1.3 常用化學(xué)消毒劑的作用機(jī)制19-22
- 1.3.1 不同種類的消毒機(jī)劑對(duì)病原微生物的作用機(jī)制19-20
- 1.3.2 影響消毒劑消毒效果的因素20-21
- 1.3.3 消毒效果的檢測(cè)21
- 1.3.4 本研究的目的與意義21-22
- 試驗(yàn)研究22-54
- 第二章 陜西省某規(guī);i場(chǎng)致仔豬腹瀉病原的分離鑒定22-29
- 2.1 材料22-23
- 2.1.1 病情與檢測(cè)樣品采集22
- 2.1.2 毒株22
- 2.1.3 主要試劑22-23
- 2.1.4 主要儀器23
- 2.2 方法23-25
- 2.2.1 樣品中TGEV和PEDV的RT-PCR檢測(cè)23-24
- 2.2.1.1 引物設(shè)計(jì)和合成23
- 2.2.1.2 病料總RNA的提取與cDNA合成23
- 2.2.1.3 TGEV和PEDV目的基因的PCR擴(kuò)增23-24
- 2.2.2 樣品中細(xì)菌分離鑒定24-25
- 2.2.2.1 細(xì)菌分離及純化24
- 2.2.2.2 分離菌的生化鑒定24
- 2.2.2.3 16s rRNA引物設(shè)計(jì)24-25
- 2.2.2.4 細(xì)菌DNA的提取24
- 2.2.2.5 細(xì)菌 16s rRNA的PCR的檢測(cè)24
- 2.2.2.6 PCR產(chǎn)物的序列測(cè)定24
- 2.2.2.7 分離菌的藥物敏感性試驗(yàn)24-25
- 2.3 結(jié)果25-28
- 2.3.1 病料中TGEV和PEDV的RT-PCR檢測(cè)25
- 2.3.2 細(xì)菌分離鑒定25-28
- 2.3.2.1 細(xì)菌分離及純化25-26
- 2.3.2.2 分離菌株的生化26-27
- 2.3.2.3 分離菌基因組 16s rRNA分析27
- 2.3.2.4 分離菌的藥敏試驗(yàn)27-28
- 2.4 治療效果28
- 2.5 討論28
- 2.6 小結(jié)28-29
- 第三章 四種化學(xué)消毒劑對(duì)豬場(chǎng)常見病原菌的殺菌作用研究29-45
- 3.1 材料29-30
- 3.1.1 菌株29
- 3.1.2 主要試劑及培養(yǎng)基的配制29-30
- 3.1.3 主要儀器30
- 3.1.4 消毒劑的配制30
- 3.2 方法30-32
- 3.2.1 菌株的復(fù)蘇30
- 3.2.2 菌落總數(shù)的測(cè)定30
- 3.2.3 菌懸液的制備30
- 3.2.4 中和劑懸液定量鑒定試驗(yàn)30-31
- 3.2.5 懸液定量殺菌試驗(yàn)31-32
- 3.2.6 有機(jī)物對(duì)四種消毒劑的殺菌效果的影響32
- 3.3 結(jié)果32-42
- 3.3.1 菌落總數(shù)測(cè)定結(jié)果32
- 3.3.2 中和劑使用量的確定32-33
- 3.3.3 懸液定量殺菌結(jié)果33-40
- 3.3.3.1 溴化二甲基二癸基烴銨消毒劑對(duì)4種病原菌的殺滅作用33-35
- 3.3.3.2 戊二醛--癸甲溴胺消毒劑對(duì)4種病原菌的殺滅作用35-37
- 3.3.3.3 過硫酸氫鉀消毒劑對(duì)4種病原菌的殺滅作用37-39
- 3.3.3.4 次氯酸鈉消毒劑對(duì)4種病原菌的殺滅作用39-40
- 3.3.4 有機(jī)物存在情況下四種消毒劑的殺菌作用40-42
- 3.3.4.1 存在有機(jī)干擾物時(shí)四種消毒劑對(duì)大腸埃希菌的殺滅作用40-41
- 3.3.4.2 存在有機(jī)干擾物時(shí)四種消毒劑對(duì)金黃色葡萄球菌的殺滅作用41-42
- 3.4 討論42-43
- 3.5 小結(jié)43-45
- 第四章 戊二醛-癸甲溴銨對(duì)豬偽狂病病毒的殺滅作用45-54
- 4.1 材料45-46
- 4.1.1 細(xì)胞、毒株45
- 4.1.2 主要儀器與試劑45
- 4.1.3 中和劑45
- 4.1.4 PRV引物設(shè)計(jì)和合成45-46
- 4.2 方法46-47
- 4.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇及病毒的增殖46
- 4.2.2 偽狂犬病病毒滴度的測(cè)定46
- 4.2.3 用于偽狂犬病病毒殺滅的消毒劑的中和劑的選擇46-47
- 4.2.4 消毒劑對(duì)偽狂犬病病毒的殺滅作用47
- 4.3 結(jié)果47-52
- 4.3.1 偽狂犬病病毒滴度的測(cè)定結(jié)果47-48
- 4.3.2 中和劑的選擇與最佳中和劑量確定48
- 4.3.3 復(fù)合消毒劑對(duì)偽狂犬病病毒殺滅作用的影響48-52
- 4.4 討論52-53
- 4.5 小結(jié)53-54
- 結(jié)論54-55
- 參考文獻(xiàn)55-60
- 縮略詞表60-61
- 致謝61-63
- 作者簡介63
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本文編號(hào):1003300
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