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BMP-2和EGFP重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細胞的研究

發(fā)布時間:2017-10-08 08:41

  本文關鍵詞:BMP-2和EGFP重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細胞的研究


  更多相關文章: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類 腺病毒科 骨髓 充質(zhì)干細胞 基因 轉(zhuǎn)染


【摘要】:目的體外培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)并觀察其生物學特性,通過腺病毒介導人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(hBMP-2)和EGFP基因轉(zhuǎn)染兔BMSCs后,觀察BMP-2和EGFP的表達情況。方法通過密度梯度離心聯(lián)合貼壁法,分離、培養(yǎng)兔BMSCs,流式細胞儀檢測細胞周期和表面標記,體外誘導兔BMSCs向成骨細胞方向分化。轉(zhuǎn)染后,免疫細胞化學染色及蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測外源基因的表達。結(jié)果兔BMSCs周期約有56.84%處于G1期;CD44表達陽性,CD45表達陰性;經(jīng)成骨細胞誘導后,Ⅰ型膠原免疫組織化學染色陽性,茜素紅染色陽性。轉(zhuǎn)染后,Western blot及免疫細胞化學染色顯示細胞內(nèi)BMP-2有較強的表達。結(jié)論成功分離、培養(yǎng)兔BMSCs,并鑒定其具有成骨分化能力;構(gòu)建的Ad-BMP-2/EGFP可高效轉(zhuǎn)染兔BMSCs,并能穩(wěn)定表達BMP-2目的基因。
【作者單位】: 桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院四肢創(chuàng)傷手外科;
【關鍵詞】骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類 腺病毒科 骨髓 充質(zhì)干細胞 基因 轉(zhuǎn)染
【基金】:國家自然科學基金資助項目(31160199)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)屬于多能造血干細胞,具有很強的成骨分化能力,已成為組織工程骨研究中最熱門、最理想的種子細胞。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)是轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)超家族的成員之一,具有很強的誘導間葉細胞向成骨分化的能力,并能夠在體內(nèi)外誘導成骨的形成,促進BMSCs向

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 何春耒;姬廣林;劉午陽;吳東寶;何澄;王茂源;葉勇軍;莫建文;高輝;;人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因重組腺病毒表達載體轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細胞[J];中國組織工程研究;2012年10期

2 李建軍;許曉軍;楊軍;付勤;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染對人骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響[J];中國醫(yī)科大學學報;2006年01期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄒磊;冀紅芹;劉禹含;宋陽;韓慧慧;孫會;秦貴信;;日糧不同鈣水平對仔豬血液BMP-2和脛骨性能的影響[J];飼料與畜牧;2014年03期

2 井樂剛;喬靜;路芳;甄鑫;盧Z,

本文編號:993084


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