本文關(guān)鍵詞：BMP-2和EGFP重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究

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【摘要】：目的體外培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)并觀察其生物學(xué)特性,通過(guò)腺病毒介導(dǎo)人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(hBMP-2)和EGFP基因轉(zhuǎn)染兔BMSCs后,觀察BMP-2和EGFP的表達(dá)情況。方法通過(guò)密度梯度離心聯(lián)合貼壁法,分離、培養(yǎng)兔BMSCs,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期和表面標(biāo)記,體外誘導(dǎo)兔BMSCs向成骨細(xì)胞方向分化。轉(zhuǎn)染后,免疫細(xì)胞化學(xué)染色及蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)外源基因的表達(dá)。結(jié)果兔BMSCs周期約有56.84%處于G1期;CD44表達(dá)陽(yáng)性,CD45表達(dá)陰性;經(jīng)成骨細(xì)胞誘導(dǎo)后,Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性,茜素紅染色陽(yáng)性。轉(zhuǎn)染后,Western blot及免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示細(xì)胞內(nèi)BMP-2有較強(qiáng)的表達(dá)。結(jié)論成功分離、培養(yǎng)兔BMSCs,并鑒定其具有成骨分化能力;構(gòu)建的Ad-BMP-2/EGFP可高效轉(zhuǎn)染兔BMSCs,并能穩(wěn)定表達(dá)BMP-2目的基因。
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院四肢創(chuàng)傷手外科;
【關(guān)鍵詞】： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類(lèi) 腺病毒科 骨髓 充質(zhì)干細(xì)胞 基因 轉(zhuǎn)染
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31160199)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)屬于多能造血干細(xì)胞,具有很強(qiáng)的成骨分化能力,已成為組織工程骨研究中最熱門(mén)、最理想的種子細(xì)胞。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)超家族的成員之一,具有很強(qiáng)的誘導(dǎo)間葉細(xì)胞向成骨分化的能力,并能夠在體內(nèi)外誘導(dǎo)成骨的形成,促進(jìn)BMSCs向

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 何春耒;姬廣林;劉午陽(yáng);吳東寶;何澄;王茂源;葉勇軍;莫建文;高輝;;人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因重組腺病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究;2012年10期

2 李建軍;許曉軍;楊軍;付勤;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄒磊;冀紅芹;劉禹含;宋陽(yáng);韓慧慧;孫會(huì);秦貴信;;日糧不同鈣水平對(duì)仔豬血液BMP-2和脛骨性能的影響[J];飼料與畜牧;2014年03期

2 井樂(lè)剛;喬靜;路芳;甄鑫;盧Z，

本文編號(hào)：993084