本文關(guān)鍵詞：利用流式分選技術(shù)富集小鼠單倍體精子細(xì)胞

  更多相關(guān)文章： 流式分選 Hoechst 染色 單倍體精子細(xì)胞 小鼠

【摘要】：目的:建立并完善流式分選單倍體精子細(xì)胞的方法。方法:制備小鼠睪丸單細(xì)胞懸液;活細(xì)胞DNA染料Hoechst 33342孵育細(xì)胞;利用流式細(xì)胞術(shù)分選富集單倍體圓形精子細(xì)胞或長型精子細(xì)胞;在分選富集得到的精子細(xì)胞中,通過RT-PCR方法檢測多種組蛋白乙�；揎椕富虻谋磉_(dá)情況;檢測組蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑姜黃素對上述基因表達(dá)的影響。結(jié)果:用Hoechst 33342染色結(jié)合流式分選方法可以高效地富集高純度的精子細(xì)胞,還可以進(jìn)一步純化圓形精子細(xì)胞與長型精子細(xì)胞。RT-PCR結(jié)果表明,與睪丸整體組織相比,精子細(xì)胞中組蛋白乙�；揎椕富虻谋磉_(dá)具有特異性,并受姜黃素處理的影響。結(jié)論:該流式分選方法提高了富集單倍體精子細(xì)胞的效率和純度,為闡明精子形成的機(jī)制提供了簡便易學(xué)、適于推廣的技術(shù)平臺。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;上海市生殖醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子細(xì)胞生物學(xué)系流式公共平臺;
【關(guān)鍵詞】： 流式分選 Hoechst 染色 單倍體精子細(xì)胞 小鼠
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(2010CB945200) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20110073120083) 上海市科委重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)基金(上海市重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)基金)(10DZ2270600)~~
【分類號】：R321
【正文快照】： 哺乳動(dòng)物的精子發(fā)生是受到精細(xì)調(diào)控的細(xì)胞分化事件。睪丸內(nèi)精子發(fā)生的微環(huán)境主要由Sertoli細(xì)胞形成,使得生精上皮的組織具有嚴(yán)格的極性。在激素及微環(huán)境的作用下,精原細(xì)胞經(jīng)有絲分裂、減數(shù)分裂形成單倍體圓形精子細(xì)胞,再經(jīng)精子形成過程產(chǎn)生單倍體長型精子,之后被輸送到附睪中

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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7 宋雪梅;影響水牛精子分離和冷凍后精子質(zhì)量相關(guān)因素的研究[D];廣西大學(xué);2013年

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3 李巖;NYD-SP6基因在無精癥患者和不同年齡段人群睪丸中的表達(dá)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

4 屈旭光;聯(lián)會(huì)復(fù)合體相關(guān)基因與犏牛雄性不育關(guān)系的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

5 王智宇;睪丸新基因的克隆及其在隱睪模型中的表達(dá)分析[D];華中科技大學(xué);2008年

6 張俊芳;小鼠精子形成期動(dòng)態(tài)發(fā)育的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

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本文編號：988406