兔動員外周血間充質(zhì)干細(xì)胞集落形成能力與神經(jīng)元誘導(dǎo)分化研究
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【摘要】:目的研究動員后兔外周血間充質(zhì)干細(xì)胞(PBMSCs)的存在頻率,并對PBMSCs進(jìn)行神經(jīng)元誘導(dǎo)分化鑒定。方法采用粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射動員,結(jié)合密度梯度離心和貼壁培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)兔外周血樣品中的PBMSCs,利用集落形成率分析動員兔PBMSCs的存在頻率,并對PBMSCs的神經(jīng)元分化能力進(jìn)行體外誘導(dǎo)鑒定。結(jié)果動員后的PBMSCs原代培養(yǎng)24h后,可見較多短梭形及多角形貼壁細(xì)胞,3~4d后出現(xiàn)集落樣生長,傳代培養(yǎng)的PBMSCs形態(tài)均一、呈長梭形漩渦狀生長;未動員的外周血樣品中的貼壁細(xì)胞少,集落形成少,且易老化,無法傳代。集落形成率實驗顯示,動員后的PBMSCs在每百萬外周血單個核細(xì)胞中有2.8~10.8個;而未動員組PBMSCs僅有0~3個。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,PBMSCs經(jīng)神經(jīng)誘導(dǎo)7d后其神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、神經(jīng)元特性核蛋白(NeuN)染色陽性。結(jié)論動員劑可提高兔外周血中的PBMSCs含量,所獲取的PBMSCs具備神經(jīng)元分化能力。
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院貴州省細(xì)胞工程重點實驗室;遵義醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 兔 外周血間充質(zhì)干細(xì)胞 集落形成率 神經(jīng)元 誘導(dǎo)分化
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81060148)~~
【分類號】:R329.28
【正文快照】: 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)因其具有體外擴(kuò)增能力強(qiáng)和多向分化潛力而成為成體干細(xì)胞研究的主要種子細(xì)胞來源[1-4],尤其是圍繞骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow derivedmesenchymal stem cells,BMMSCs)的研究最為廣泛和深入[5-6]。盡管BMMSCs有其固有的優(yōu)勢
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,本文編號:968249
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