本文關(guān)鍵詞：肺微血管內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)方法的建立

  更多相關(guān)文章： 肺微血管內(nèi)皮細胞 原代培養(yǎng) 大鼠

【摘要】：目的建立大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)方法,觀察細胞生長狀態(tài)并鑒定細胞性質(zhì)。方法 4~5周齡大鼠隨機分成3組,無菌狀態(tài)下剝除胸膜,將肺組織邊緣剪成1 mm3的大小,貼入一次性培養(yǎng)瓶,分別用含肝素鈉的DMEM完全培養(yǎng)液、RPMI1640完全培養(yǎng)液以及含原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)特制添加劑的完全培養(yǎng)液培養(yǎng),在倒置顯微鏡下觀察細胞生長和形態(tài),免疫熒光組織化學(xué)染色觀察細胞CD31的表達。結(jié)果與2組對照組相比,采用含原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)特制添加劑的完全培養(yǎng)液培養(yǎng),獲得的肺微血管內(nèi)皮細胞數(shù)量多,純度高。內(nèi)皮細胞于24 h遷移出肺組織塊,14 d左右匯合,呈多角形,以鋪路石樣鑲嵌狀排列生長。傳代細胞呈長梭形,生長迅速,具有自發(fā)形成血管的傾向。細胞為CD31免疫反應(yīng)陽性,證實其為內(nèi)皮細胞。結(jié)論采用組織塊貼壁法,選擇原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)特制添加劑以及優(yōu)化分離過程,可以獲得高純度原代大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞。
【作者單位】： 長治醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;長治醫(yī)學(xué)院機能綜合實驗室;長治醫(yī)學(xué)院肝病研究所;長治醫(yī)學(xué)院人體寄生蟲學(xué)教研室;長治醫(yī)學(xué)院藥理教研室;
【關(guān)鍵詞】： 肺微血管內(nèi)皮細胞 原代培養(yǎng) 大鼠
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81070339) 山西省高等學(xué)�？萍紕�(chuàng)新項目(2010120) 山西省國際科技合作項目(2010081068) 山西醫(yī)科大學(xué)細胞生理學(xué)省部共建教育部重點實驗室主任基金(2010-09) 山西省回國留學(xué)人員資助項目(211-091)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 肺微血管內(nèi)皮細胞覆蓋在肺微血管腔表面,不僅是血管內(nèi)外物質(zhì)交換的重要屏障,而且是循環(huán)中危險因素作用的重要靶標。許多致病因素如炎癥、缺氧、氧化應(yīng)激、內(nèi)毒素等都可以刺激內(nèi)皮細胞分泌細胞因子,后者在血管相關(guān)性疾病中發(fā)揮重要作用[1]。由于不同器官的內(nèi)皮細胞特性不同[2-3

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李穎川;江偉;周明;薛瑛;李亞春;;大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)方法的改進及細胞鑒定[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年11期

2 時全星;孫新;李娟;郭海濤;殷s，

本文編號：963610