本文關(guān)鍵詞：高靈敏焦測序結(jié)合生物發(fā)光分析儀檢測甲型H1N1流感病毒

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【摘要】：目的:建立基于核酸序列分析的快速、準(zhǔn)確、低成本的甲型H1N1流感病毒檢測方法。方法:通過優(yōu)化焦測序反應(yīng)體系中ATP硫酸化酶和熒光素酶的濃度,建立高靈敏的焦測序反應(yīng)體系;將該體系應(yīng)用于低成本、小型化的便攜式生物發(fā)光分析儀,焦測序分析流感病毒M、NP、HA基因片段的核酸序列。結(jié)果:優(yōu)化后的焦測序反應(yīng)體系可檢測低至10 fmol的DNA樣本,檢測靈敏度較傳統(tǒng)焦測序提高了10倍以上。對(duì)兩例樣本進(jìn)行檢測,根據(jù)所測得的M、NP、HA基因特異性片段序列,可以確認(rèn)其均為甲型H1N1感染;另外,對(duì)M2蛋白阻斷劑耐藥性標(biāo)志位點(diǎn)(S31N突變)的測定結(jié)果顯示該病毒存在S31N突變,為M2蛋白阻斷劑耐藥型。結(jié)論:高靈敏焦測序體系結(jié)合便攜式生物發(fā)光分析儀成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)甲型H1N1流感病毒快速、準(zhǔn)確的低成本檢測。
【作者單位】： 華東醫(yī)學(xué)生物技術(shù)研究所;南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金陵醫(yī)院藥理科;
【關(guān)鍵詞】： 高靈敏焦測序 甲型HN流感病毒 耐藥性突變 便攜式生物發(fā)光分析儀
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31300706) 江蘇省科技支撐計(jì)劃-社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(BE2011607) 第54批中國博士后科學(xué)基金面上資助項(xiàng)目(2013M542575)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 個(gè)基因,分別編碼八種結(jié)構(gòu)蛋白(PB2B1前言、P、PA、HA、NP、NA、M1、M2)及兩種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、NS2)[3,4]。根據(jù)HA與NA的人類與流感的抗?fàn)庁灤┱麄�(gè)人類的歷史,每一次流感的大不同亞型組合,甲型流感病毒可分為各種血清型,而眾多的血流行都給人類帶來恐懼和挑戰(zhàn),但同時(shí)也推動(dòng)著人

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 洪亮;通用型電致發(fā)光分析儀的研制[D];華東師范大學(xué);2008年

2 王志佳;通用型電致發(fā)光分析儀的觸摸屏和三維圖形顯示的實(shí)現(xiàn)[D];華東師范大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：959869