本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外體提取方法的比較

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【摘要】：目的比較蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外體(hucMSC-Ex)在高豐度蛋白質(zhì)含量和純度上的差異。方法分別用蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取hucMSC-Ex,透射電鏡下觀察兩法提取的外體的形態(tài)結(jié)構(gòu),SDS-PAGE分析二者的蛋白質(zhì)組分,western blot檢測(cè)二者的表面標(biāo)志蛋白CD9和CD81,免疫熒光法檢測(cè)二者內(nèi)化至靶細(xì)胞EA.hy926的數(shù)量。結(jié)果兩種方法提取的hucMSC-Ex均為直徑約30~100 nm的圓形或橢圓形膜性囊泡結(jié)構(gòu);在相同蛋白質(zhì)總量下,差速離心法提取的hucMSC-Ex高豐度蛋白質(zhì)含量明顯低于蔗糖密度梯度離心法,但其表面標(biāo)志蛋白CD9和CD81的表達(dá)量卻明顯高于蔗糖密度梯度離心法;在相同蛋白質(zhì)濃度下,差速離心法提取的hucMSC-Ex被靶細(xì)胞EA.hy926細(xì)胞內(nèi)化的數(shù)量更多。結(jié)論兩種方法均能成功提取hucMSC-Ex,差速離心法提取的hucMSC-Ex純度更高,而高豐度蛋白質(zhì)含量明顯降低。
【作者單位】： 鎮(zhèn)江市檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 外體 差速離心法 蔗糖密度梯度離心法 比較
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31340040,81272481,81270214) 江蘇高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)[蘇教科(2013)10號(hào)] 江蘇省醫(yī)學(xué)領(lǐng)軍人才與創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(LJ201117) 江蘇省2013年度普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(CXZZ13_0703)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)來(lái)源的外體(exosome)在損傷修復(fù)中的作用日漸受到廣泛關(guān)注。本課題組的前期研究表明,人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外體(hucMSC-Ex)能修復(fù)四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的肝纖維化[1]以及順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷[2],但究竟何種蛋白質(zhì)成分起關(guān)鍵作用尚

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：958896