人臍帶間充質干細胞來源外體提取方法的比較
本文關鍵詞:人臍帶間充質干細胞來源外體提取方法的比較
更多相關文章: 臍帶間充質干細胞 外體 差速離心法 蔗糖密度梯度離心法 比較
【摘要】:目的比較蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取的臍帶間充質干細胞來源外體(hucMSC-Ex)在高豐度蛋白質含量和純度上的差異。方法分別用蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取hucMSC-Ex,透射電鏡下觀察兩法提取的外體的形態(tài)結構,SDS-PAGE分析二者的蛋白質組分,western blot檢測二者的表面標志蛋白CD9和CD81,免疫熒光法檢測二者內化至靶細胞EA.hy926的數量。結果兩種方法提取的hucMSC-Ex均為直徑約30~100 nm的圓形或橢圓形膜性囊泡結構;在相同蛋白質總量下,差速離心法提取的hucMSC-Ex高豐度蛋白質含量明顯低于蔗糖密度梯度離心法,但其表面標志蛋白CD9和CD81的表達量卻明顯高于蔗糖密度梯度離心法;在相同蛋白質濃度下,差速離心法提取的hucMSC-Ex被靶細胞EA.hy926細胞內化的數量更多。結論兩種方法均能成功提取hucMSC-Ex,差速離心法提取的hucMSC-Ex純度更高,而高豐度蛋白質含量明顯降低。
【作者單位】: 鎮(zhèn)江市檢驗醫(yī)學重點實驗室 江蘇大學基礎醫(yī)學與醫(yī)學技術學院;
【關鍵詞】: 臍帶間充質干細胞 外體 差速離心法 蔗糖密度梯度離心法 比較
【基金】:國家自然科學基金(31340040,81272481,81270214) 江蘇高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新團隊[蘇教科(2013)10號] 江蘇省醫(yī)學領軍人才與創(chuàng)新團隊(LJ201117) 江蘇省2013年度普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃(CXZZ13_0703)
【分類號】:R329
【正文快照】: 間充質干細胞(mesenchymal stem cell,MSC)來源的外體(exosome)在損傷修復中的作用日漸受到廣泛關注。本課題組的前期研究表明,人臍帶間充質干細胞來源的外體(hucMSC-Ex)能修復四氯化碳(CCl4)誘導的肝纖維化[1]以及順鉑誘導的急性腎損傷[2],但究竟何種蛋白質成分起關鍵作用尚
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,本文編號:958896
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