本文關鍵詞：人臍帶間充質干細胞來源外體提取方法的比較

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【摘要】：目的比較蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取的臍帶間充質干細胞來源外體(hucMSC-Ex)在高豐度蛋白質含量和純度上的差異。方法分別用蔗糖密度梯度離心法和差速離心法提取hucMSC-Ex,透射電鏡下觀察兩法提取的外體的形態(tài)結構,SDS-PAGE分析二者的蛋白質組分,western blot檢測二者的表面標志蛋白CD9和CD81,免疫熒光法檢測二者內化至靶細胞EA.hy926的數量。結果兩種方法提取的hucMSC-Ex均為直徑約30~100 nm的圓形或橢圓形膜性囊泡結構;在相同蛋白質總量下,差速離心法提取的hucMSC-Ex高豐度蛋白質含量明顯低于蔗糖密度梯度離心法,但其表面標志蛋白CD9和CD81的表達量卻明顯高于蔗糖密度梯度離心法;在相同蛋白質濃度下,差速離心法提取的hucMSC-Ex被靶細胞EA.hy926細胞內化的數量更多。結論兩種方法均能成功提取hucMSC-Ex,差速離心法提取的hucMSC-Ex純度更高,而高豐度蛋白質含量明顯降低。
【作者單位】： 鎮(zhèn)江市檢驗醫(yī)學重點實驗室 江蘇大學基礎醫(yī)學與醫(yī)學技術學院;
【關鍵詞】： 臍帶間充質干細胞 外體 差速離心法 蔗糖密度梯度離心法 比較
【基金】：國家自然科學基金(31340040,81272481,81270214) 江蘇高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新團隊[蘇教科(2013)10號] 江蘇省醫(yī)學領軍人才與創(chuàng)新團隊(LJ201117) 江蘇省2013年度普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃(CXZZ13_0703)
【分類號】：R329
【正文快照】： 間充質干細胞(mesenchymal stem cell,MSC)來源的外體(exosome)在損傷修復中的作用日漸受到廣泛關注。本課題組的前期研究表明,人臍帶間充質干細胞來源的外體(hucMSC-Ex)能修復四氯化碳(CCl4)誘導的肝纖維化[1]以及順鉑誘導的急性腎損傷[2],但究竟何種蛋白質成分起關鍵作用尚

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1 馮立新,許倩,王棟,肖桂芝;兔骨髓間充質干細胞的分離方法[J];承德醫(yī)學院學報;2005年03期

2 陸曉茜;劉霆;;骨髓間充質干細胞的生物學特性及其臨床應用[J];四川醫(yī)學;2005年12期

3 甘鳳英;葉德富;;間充質干細胞向軟骨方向分化的研究[J];醫(yī)學綜述;2006年11期

4 李府;馬麗霞;張樂玲;鄭立波;陳穎杰;吳鎮(zhèn);王世富;;細胞因子聯(lián)合紋狀體條件培養(yǎng)液定向誘導間充質干細胞體外分化為多巴胺能神經元的研究(英文)[J];實用兒科臨床雜志;2009年24期

5 林滬;陳黎明;王福生;;間充質干細胞在肝臟的分化機制研究進展[J];實用肝臟病雜志;2010年03期

6 郭希民 ,王常勇 ,王永紅 ,段翠密 ,趙強 ,孫大銘;人骨髓間充質干細胞分離培養(yǎng)及向軟骨細胞定向分化的實驗研究[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2003年01期

7 楊自權,衛(wèi)小春,郝一勇,焦強,丁娟,李鵬翠,陳崇偉;兔骨髓間充質干細胞的分離培養(yǎng)及其生物學性狀的研究[J];中國骨傷;2004年05期

8 鞠曉東,婁思權,田華,王衛(wèi)國,劉延青;脂肪間充質干細胞的基本生物學特性及向成骨細胞誘導分化的實驗研究[J];中華實驗外科雜志;2004年06期

9 邢瑩,景瑩,楊紅旗,韓雪飛;兔骨髓間充質干細胞向神經元的誘導分化[J];河南醫(yī)學研究;2004年02期

10 牛國棟,任曉慶,王方正,浦介麟,楊國勝,孟亮,張澍;采用1.068g/ml分離液對犬骨髓間充質干細胞的分離純化與體外培養(yǎng)方法的探討[J];中國分子心臟病學雜志;2005年04期

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1 王巧稚;韓藝;趙宏賢;余鴻;劉廣益;;當歸誘導人脂肪間充質干細胞向神經細胞分化和毒性檢測的研究[A];中國解剖學會第十一屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文匯編[C];2009年

2 郭勇;張西正;郭春;魏嚴;李瑞欣;徐曉瑩;張永紅;;脂肪間充質干細胞向心肌細胞分化中心肌發(fā)育相關基因的表達[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2008年年會暨首屆生物醫(yī)學工程與臨床論壇論文集[C];2008年

3 朱恒;江小霞;劉元林;張毅;毛寧;;間充質干細胞選擇性調節(jié)破骨細胞發(fā)育和功能[A];第13屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2011年

4 張顥;陶艷玲;邱林;張伯龍;馬軍;陳志哲;劉擁軍;韓忠朝;;一種具有免疫負調節(jié)功能的人臍帶源間充質干細胞[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

5 楊少光;池穎;戎麗娟;邢文;盧士紅;趙欽軍;馬鳳霞;韓忠朝;;不同來源間充質干細胞誘導分化成血管內皮細胞的比較[A];第13屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2011年

6 郭振興;鄭翠玲;陳振萍;董文川;楊仁池;;胚胎骨髓來源的間充質干細胞對人Th17細胞免疫調節(jié)作用的研究[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

7 吳英;朱恒;江小霞;孔維霞;劉元林;李秀森;張毅;毛寧;;分化后的間充質干細胞調節(jié)CD11b+單核細胞分化為破骨細胞[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

8 郭勇;張西正;李瑞欣;郭春;閆玉仙;孫鵑;;凍存和傳代后的脂肪間充質干細胞向心肌樣細胞分化[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第29屆學術年會暨首屆生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2009年

9 馬曉榮;張勝利;吳齊全;高同斌;周君梅;謝華;陳方;;應用5-雜氮脫氧胞苷誘導人羊水來源間充質干細胞向成肌細胞樣細胞分化的體外實驗研究[A];中華醫(yī)學會第八次全國小兒外科學術會論文集[C];2010年

10 張東輝;許永華;許琴;李建瑛;是文輝;李佳佳;盧開伯;邢彥超;于良寬;龍志新;;“三階段法”分離培養(yǎng)與鑒定人臍血間充質干細胞[A];第九屆中國實驗動物科學年會（2010新疆）論文集[C];2010年

中國重要報紙全文數據庫 前10條

1 記者 白毅;間充質干細胞可促進成熟樹突狀細胞增殖分化[N];中國醫(yī)藥報;2009年

2 徐機玲;姜躍進;我國骨髓干細胞移植技術獲突破[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 徐機玲 姜躍進;骨髓干細胞移植我國實現新突破[N];新華每日電訊;2003年

4 本報記者 吳潔;打造新世紀朝陽產業(yè)[N];科技日報;2001年

5 李長久　;器官移植技術的發(fā)展和應用[N];經濟參考報;2002年

6 本刊記者 建法　德易 特約記者 李翠平;京蒙干細胞公司：為打造人類健康和高品質生活創(chuàng)造新業(yè)績[N];中國國門時報;2011年

7 記者 馮國梧;專家提出干細胞研究及應用須發(fā)展和監(jiān)管兩手抓[N];科技日報;2010年

8 王淑君　馬浩劍;我市正式進軍干細胞研究治療[N];常州日報;2011年

9 本報記者 宋廣玉　本報通訊員 陳寧 洪立軍;自體干細胞應用從整形美容拓展到再生醫(yī)學[N];南京日報;2011年

10 深圳特區(qū)報記者 范京蓉;5年專注研發(fā) 技術領先世界[N];深圳特區(qū)報;2011年

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1 彭飛;620nm非相干紅光對大鼠骨髓間充質干細胞的光生物調節(jié)作用[D];華中科技大學;2011年

2 李東杰;人臍帶間充質干細胞促進創(chuàng)面愈合及體外誘導分化為表皮樣細胞的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2011年

3 趙迎澤;BMP9通過MAPKs通路調控間充質干細胞成骨分化及其機制的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

4 孫昭;間充質干細胞免疫調節(jié)功能及其機制的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2007年

5 王海濤;大鼠骨髓間充質干細胞誘導同種異體心臟移植免疫耐受[D];復旦大學;2007年

6 謝姜;人臍帶間充質干細胞誘導轉化成神經干細胞及其移植治療腦出血的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

7 劉麗輝;獼猴間充質干細胞聯(lián)合非清髓單倍體造血干細胞移植的實驗研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

8 楊禮慶;胰島素樣生長因子-1基因轉染對兔骨髓間充質干細胞向軟骨細胞分化的影響[D];中國醫(yī)科大學;2006年

9 王丁;CD14~+單核細胞增強人臍帶間充質干細胞的免疫抑制作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

10 李靜遠;人骨髓間充質干細胞端粒調控機制的研究[D];浙江大學;2006年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 章守琴;人羊膜間充質干細胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學院;2010年

2 張茜真;人臍帶間充質干細胞的分離、鑒定以及干細胞特異性轉錄因子誘導其重編程的研究[D];浙江理工大學;2010年

3 陳義;臍帶間充質干細胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學;2010年

4 齊凱;人臍帶來源間充質干細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化初探[D];山西醫(yī)科大學;2011年

5 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質干細胞的研究[D];中國醫(yī)科大學;2010年

6 田毅;人臍帶Wharton's jelly間充質干細胞的生物學特性以及其與腦腫瘤干細胞共培養(yǎng)的實驗研究[D];鄭州大學;2010年

7 李敏;人臍帶間充質干細胞三維載體接種方法的研究[D];蘭州大學;2011年

8 朱華民;兩種細胞因子組合誘導人臍帶間充質干細胞向肝樣細胞分化的研究[D];暨南大學;2010年

9 周長輝;人臍帶Wharton's Jelly及子宮內膜間充質干細胞免疫調節(jié)作用研究[D];鄭州大學;2010年

10 肖盼;培養(yǎng)人羊膜間充質干細胞構建組織工程角膜上皮層的實驗研究[D];暨南大學;2010年

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本文編號：958896