本文關(guān)鍵詞：真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP-AMH的構(gòu)建及鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建人AMH基因的真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP-AMH。方法從COV434細(xì)胞中獲取AMH基因片段,經(jīng)EcoRI、BglII雙酶切定向克隆至載體pIRES2-EGFP,構(gòu)建pIRES2-EGFP-AMH。經(jīng)雙酶切和測(cè)序鑒定后轉(zhuǎn)染COV434細(xì)胞,通過(guò)熒光定量PCR和細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)AMH基因的表達(dá)變化。結(jié)果重組人AMH真核表達(dá)質(zhì)粒經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定正確,轉(zhuǎn)染后能顯著提高AMH mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)論人AMH真核表達(dá)載體構(gòu)建成功,為進(jìn)一步研究人AMH基因的功能提供初步的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué);寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 抗苗勒氏管激素 COV細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 表達(dá)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260109) 寧夏自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NZ10115) 寧夏科技攻關(guān)資助項(xiàng)目(KF201049)
【分類號(hào)】：R3416
【正文快照】： 抗苗勒氏管激素(AMH)屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)超家族成員,基因定位于人類19號(hào)染色體p13.3上,全長(zhǎng)1 690 bp。研究發(fā)現(xiàn)人類AMH基因中,有21個(gè)基因與細(xì)胞周期相關(guān),13個(gè)基因與細(xì)胞凋亡相關(guān)和52個(gè)基因與腫瘤途徑相關(guān)[1]。其具體調(diào)控機(jī)制與途徑目前尚不清楚。AMH是目前已知體內(nèi)唯

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：952525