發(fā)布時間：2017-09-28 15:10

  本文關(guān)鍵詞：高效價抗腸道病毒71型兔血清的制備及鑒定

  更多相關(guān)文章： 腸道病毒 家兔 抗血清 酶聯(lián)免疫吸附測定 免疫雙擴散 中和抗體

【摘要】：目的制備高效價的抗腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)兔血清。方法分別用RD細胞和Vero細胞培養(yǎng)EV71,純化后,將經(jīng)甲醛滅活和未滅活的EV71抗原分別加入佐劑或不加佐劑,經(jīng)不同途徑(肌肉、皮下、腹腔)免疫家兔,每周采血,分離血清,分別采用ELISA、免疫雙擴散、免疫熒光和中和抗體試驗檢測兔血清抗體效價,并分析不同方法檢測兔血清抗體結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果未滅活和滅活的純化EV71抗原加弗氏佐劑后,經(jīng)皮下或肌肉途徑免疫家兔均可獲得高效價的抗EV71兔血清,其中加弗氏佐劑的滅活疫苗經(jīng)皮下途徑免疫獲得了最高滴度的中和抗體;當抗血清ELISA效價達到或接近1∶108,免疫雙擴散效價達到或接近1∶512,抗血清1∶2 000稀釋后熒光強度荻時,可進行免疫家兔的全血采集;不同方法免疫家兔全血采集的血清中和抗體效價為29 406~1 280 652 U/0.2 ml;免疫雙擴散檢測與中和抗體和免疫熒光檢測結(jié)果的相關(guān)性較高。結(jié)論獲得了高效價的抗EV71兔血清,為EV71疫苗抗原的相關(guān)檢定創(chuàng)造了條件。
【作者單位】： 武漢生物制品研究所有限責任公司;
【關(guān)鍵詞】： 腸道病毒 家兔 抗血清 酶聯(lián)免疫吸附測定 免疫雙擴散 中和抗體
【分類號】：R392
【正文快照】： 近幾年,手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)的發(fā)病情況在我國日趨嚴重,其中由腸道病毒71(enterovirus 71,EV71)引發(fā)的HFMD對患兒造成的危害更大[1-2]。針對近些年HFMD的流行狀況,目前國內(nèi)有幾家單位研制的EV71疫苗已完成III期臨床試驗[3-4]。隨著EV71疫苗臨近上市,需

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王繼麟;朱家鴻;徐葛林;胡巧玲;;用免疫細胞化學、RT-PCR等方法定量檢測狂犬病毒及其核酸的比較研究[J];中國人獸共患病學報;2007年02期

2 梁爭論;;我國腸道病毒71型滅活疫苗研發(fā)現(xiàn)狀[J];中國病毒病雜志;2012年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王新偉;余光開;;狂犬病診斷的研究進展[J];現(xiàn)代診斷與治療;2008年04期

2 劉富強;陳立章;高立冬;張紅;;湖南省家犬感染狂犬病病毒狀況調(diào)查研究[J];中國預防獸醫(yī)學報;2009年09期

3 王繼麟;朱家鴻;徐葛林;;靶向PV株核蛋白基因的小分子干擾RNA對不同狂犬病病毒毒株復制的交叉抑制作用[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2008年03期

4 韓樹生;王健;吳娜;遲新宇;;大劑量短療程靜脈滴注人免疫球蛋白治療重癥手足口病51例[J];中國藥業(yè);2013年17期

5 憨貞慧;;康復新液與碘甘油治療手足口病的療效比較[J];中國醫(yī)藥指南;2013年27期

6 王瓊珠;范長玲;;白細胞介素2基因多態(tài)性與手足口病EV71腦炎患者的關(guān)聯(lián)性分析[J];分子診斷與治療雜志;2014年01期

7 王楚;詹學;;重癥手足口病的早期識別[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年23期

8 任慶云;何麗;劉齋;王偉秀;;腸道病毒71型感染手足口病合并急性弛緩性麻痹的臨床及MRI分析[J];醫(yī)學影像學雜志;2014年04期

9 王軒;高帆;毛群穎;王一平;王超;邵杰;游松;安文琪;徐苗;梁爭論;;EV71與CA16雙價滅活疫苗誘導小鼠免疫原性研究[J];微生物學免疫學進展;2014年02期

10 蔡妍;林敏;楊惠鈿;章金燦;張淡璇;;CRP與中毒顆粒對腸道病毒71感染病情判斷價值分析[J];分子診斷與治療雜志;2014年05期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 邵益斌，顧勤，曾蓉芳;應用快速HEPES蝕斑法檢測狂犬病毒[J];中國病毒學;1994年01期

2 梁爭論;;腸道病毒71型疫苗候選株和疫苗標準的研究[J];中國病毒病雜志;2011年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 吳新偉,傅明德;前β_1-HDL的純化與鑒定[J];華西醫(yī)科大學學報;2000年04期

2 王繼麟;陳曉琦;吳杰;明平剛;宰家敏;郭長福;楊京生;段凱;;高效價抗腸道病毒71型兔血清的制備及鑒定[J];中國生物制品學雜志;2014年05期

3 邵世和,王媛,嚴杰;幽門螺桿菌臨床菌株2148bp的cagA基因片段克隆、表達及免疫性鑒定[J];中國人獸共患病雜志;2004年07期

4 陳紅杰;張悅紅;劉德文;;人血清Lp(a)的抗血清制備[J];山西醫(yī)學院學報;1993年04期

5 何小曼;張超;楊文沖;童軍;劉穎;王丹;欒勇;王瑋欣;王超;;葡萄球菌蛋白A的純化新工藝[J];中國生物制品學雜志;2007年07期

6 涂建成，，鄭先公，周新，李小明，陳麗達，胡漢寧，洪嘉玲;一種簡易制備白蛋白純品及抗血清的方法──凝膠切割制備法[J];湖北醫(yī)科大學學報;1996年04期

7 ;[J];;年期

本文編號：936529