發(fā)布時(shí)間：2017-09-21 01:22

  本文關(guān)鍵詞：比格犬ERβ剪切異構(gòu)體ERβ419沉默表達(dá)載體的構(gòu)建及篩選

  更多相關(guān)文章： 比格犬ERβ 穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系 基因沉默

【摘要】：目的構(gòu)建最有效的慢病毒介導(dǎo)RNAi干擾序列,未來(lái)將應(yīng)用于比格犬ERβ419的未知生物學(xué)功能的探索。方法模擬比格犬ERβ419靶細(xì)胞篩選針對(duì)目的基因mRNA設(shè)計(jì)的最佳干擾序列實(shí)驗(yàn),通過(guò)qRT-PCR和Western Blot技術(shù)篩選最佳沉默表達(dá)載體序列。結(jié)果qRT-PCR結(jié)果顯示,ERβ419-shRNA1(P0.01)和ERβ419-shRNA3(P0.01)的差異表達(dá)極顯著,Western Blot結(jié)果與qRT-PCR結(jié)果一致,ERβ419-shRNA3的干擾效果最佳。結(jié)論 ERβ419-shRNA3最有效地抑制了目的基因的表達(dá),未來(lái)將應(yīng)用于探索比格犬ERβ419未知生物學(xué)功能對(duì)比格犬生殖系統(tǒng)影響的研究,并進(jìn)而預(yù)防和治療比格犬繁殖機(jī)能障礙性疾病。
【作者單位】： 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;五棵樹(shù)經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所;
【關(guān)鍵詞】： 比格犬ERβ 穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系 基因沉默
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31372271)
【分類號(hào)】：R-332
【正文快照】： 。比格犬ERβ419為該犬最新發(fā)現(xiàn)的ERβ剪切異構(gòu)體,尚無(wú)其生物學(xué)功能的報(bào)道。ERβ419 c DNA序列由下丘腦-垂體-性腺軸提純得到,ERβ419由1257個(gè)堿基組成,編碼419aa,命名為ERβ419。研究未知基因的生物學(xué)功能通常借助于慢病毒介導(dǎo)RNAi重組載體,本實(shí)驗(yàn)旨在篩選最有效的沉默表達(dá)載

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本文編號(hào)：891557