本文關(guān)鍵詞：電穿孔介導(dǎo)馬爾尼菲青霉轉(zhuǎn)化體系的建立和優(yōu)化

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【摘要】：目的建立和優(yōu)化馬爾尼菲青霉電穿孔轉(zhuǎn)化體系,為其基因功能研究提供良好平臺(tái)。方法直接使用馬爾尼菲青霉缺陷株SPM4(pyrG-,niaD-)萌發(fā)孢子進(jìn)行電穿孔轉(zhuǎn)化,并通過(guò)改變孢子齡、孢子萌發(fā)時(shí)間、質(zhì)粒濃度、電場(chǎng)強(qiáng)度等影響因素對(duì)體系進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果適合SPM4電穿孔轉(zhuǎn)化條件為:孢子齡為6 d,孢子萌發(fā)時(shí)間為4 h,電場(chǎng)強(qiáng)度為5 kV/cm。上述條件下分別使用1μg環(huán)狀或線性化質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化SPM4,平均可得到21個(gè)和13個(gè)轉(zhuǎn)化子。結(jié)論馬爾尼菲青霉電穿孔轉(zhuǎn)化效率高,重復(fù)性好,針對(duì)SPM4萌發(fā)孢子,環(huán)狀質(zhì)粒較線性化質(zhì)粒電穿孔轉(zhuǎn)化效率高。
【作者單位】： 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院;貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 馬爾尼菲青霉 萌發(fā)孢子 電穿孔
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81171545)
【分類號(hào)】：R379.9
【正文快照】： 馬爾尼菲青霉是一種雙相型真菌,室溫培養(yǎng)時(shí)以菌絲形態(tài)生長(zhǎng),37℃培養(yǎng)或感染人體后以酵母細(xì)胞形態(tài)生長(zhǎng),感染人體后可引起一種嚴(yán)重的深部真菌病,該病在免疫受損患者尤其是HIV感染患者中多見(jiàn)[1]。有研究表明,馬爾尼菲青霉的致病性與acuD、hsp 70和hsp 90等基因有關(guān)[2-4]。通過(guò)克隆

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 秦玉靜,金建玲,鮑曉明,高東;影響釀酒酵母電擊轉(zhuǎn)化率的條件[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1999年02期

2 張洋;王志強(qiáng);劉斌;張曉軍;姜楓;相建海;;DH10B菌株高效電轉(zhuǎn)化條件探究[J];生物工程學(xué)報(bào);2007年02期

3 李松;王正祥;;黑曲霉電轉(zhuǎn)化條件的研究[J];微生物學(xué)雜志;2010年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王伯華;許楊;李燕萍;;橙色紅曲菌pyrG缺陷株的篩選及鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年28期

2 王娜;李瀅;湯暉;王子玉;楊海俠;張利平;;外源DNA導(dǎo)入釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2.558電轉(zhuǎn)化條件的研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年09期

3 熊萍萍;榮俊;;多殺性巴氏桿菌C48-16電轉(zhuǎn)化條件的研究[J];長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2007年04期

4 薛全;王道勝;趙靜;花日茂;陳曉琳;唐欣昀;;馬拉硫磷降解菌缺陷短波單胞菌L19菌株的luxAB基因標(biāo)記及其在土壤中的存活[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年05期

5 王紅日;陳雪燕;程敦公;李青;曹新有;;酵母電擊轉(zhuǎn)化效率影響因素研究[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年01期

6 高炳淼;唐天樂(lè);長(zhǎng)孫東亭;羅素蘭;;畢赤酵母高效電轉(zhuǎn)化條件的研究[J];中國(guó)海洋藥物;2010年02期

7 肖沖;王春鳳;;乳酸菌電轉(zhuǎn)化的原理與轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化[J];吉林畜牧獸醫(yī);2010年07期

8 姚晶;吳正鈞;任婧;;奶牛β-1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因在畢赤酵母GS115中的轉(zhuǎn)化表達(dá)及發(fā)酵優(yōu)化[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2012年06期

9 張啟聲;李s，

本文編號(hào)：874229