本文關(guān)鍵詞：早期應(yīng)激損害海馬學(xué)習(xí)記憶突觸功能機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 發(fā)育 應(yīng)激 記憶 海馬

【摘要】：留守兒童心理和情緒的問題往往容易被注意和觀察到,而認(rèn)知問題常常容易被忽略�，F(xiàn)今,越來越多的實驗室和臨床研究結(jié)果顯示,長期遭受忽略、歧視、謾罵甚至是虐待等傷害性刺激的機(jī)體,其認(rèn)知、決策能力的損害非常嚴(yán)重,包括空間記憶、工作記憶及判定和決策能力等。在生命發(fā)育早期,長期慢性的不良應(yīng)激可導(dǎo)致機(jī)體記憶能力受損至成年。在我國,留守兒童問題日益嚴(yán)重,據(jù)我國第六次人口普查資料報告顯示,我國農(nóng)村留守兒童數(shù)量已超過六千萬,其中學(xué)齡前留守兒童(0-5歲)占38.37%,且有上升趨勢。這一群體長期缺乏、甚至得不到父母的關(guān)愛和監(jiān)護(hù),大多數(shù)留守兒童長期生活在充滿傷害性刺激的生活環(huán)境中,很多的留守兒童已經(jīng)存在心理缺陷及情感問題,而且智力發(fā)育也嚴(yán)重滯后于正常家庭中成長的同齡兒童。在國內(nèi),較多學(xué)者和專家存在著一種定向思維,他們認(rèn)為留守兒童本質(zhì)上其實是父母與年幼子女分離,在動物模型的研究中應(yīng)該選擇母-幼分離動物模型最為合適。然而,在國外,這種定向思維是不準(zhǔn)確的。母-幼分離的動物模型不能很好的模擬人類社會父母與年幼子女間的分離,且國外該領(lǐng)域的絕大多數(shù)研究結(jié)果已經(jīng)顯示：母-幼分離30分鐘——3小時(目前的最長分離時間)對幼鼠有益,而不是有害�？赡艿脑蚴牵耗甘笾鼗厥蠡\后對幼鼠有更多的“愛撫”刺激。本研究采用國外一種早年生活應(yīng)激的動物模型替代母-幼分離動物模型模擬留守兒童長期遭受慢性應(yīng)激,并運(yùn)用形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)及行為學(xué)的研究方法觀察傷害性刺激對海馬神經(jīng)元樹突棘和興奮性突觸發(fā)育、成熟和穩(wěn)定的影響。目的1、在P9/P21/P120天,分別稱量、記錄幼鼠的體重與全腦、胸腺、腎上腺等器官的質(zhì)量；2、觀察早期應(yīng)激導(dǎo)致母獸-幼崽(dam-pups)行為的變化,包括1h觀察時間內(nèi)dam-pups間哺乳情況、dam離巢次數(shù)、至少1只pup離巢的時間等；3、采用高爾基染色的方法分析P9/P21/P120天小鼠海馬錐體區(qū)神經(jīng)元樹突／樹突棘變化；4、采用物體識別試驗、物體位置識別實驗檢測P120組小鼠的認(rèn)知能力；同時,采用糖水偏好實驗及礦場等行為學(xué)實驗,分析P120組小鼠的心理和情緒問題;5、采用免疫組化方法分析P120天小鼠GluR1、PSD-95等突觸功能相關(guān)蛋白在海馬區(qū)的表達(dá)和分布情況等。方法1、建立早年生活應(yīng)激動物模型：實驗選用C57BL/6J小鼠,設(shè)應(yīng)激組和同齡對照組。從出生后第二天(P2)開始,改變幼鼠的飼養(yǎng)環(huán)境,持續(xù)一周,建立傷害性應(yīng)激動物模型；2、在模型建立之后,于P9、P21(3周齡)和P120(4月齡)三個時間點分別記錄pups體重,在P2-9天期間,每天相同時間段監(jiān)測1小時內(nèi)母鼠與幼崽的哺乳情況,至少1只幼崽離巢時間及母鼠離巢的次數(shù)；在P9、P21及P120日清晨(0900),部分應(yīng)激組與同齡對照組小鼠稱重后頸椎脫臼處死,收集P9日齡小鼠血液,分離所有犧牲掉的小鼠全腦、胸腺及雙側(cè)腎上腺并稱重,其中部分新鮮鼠腦稱重后,迅速切片處理,行后續(xù)高爾基浸漬染色實驗,目的是研究上述三個時間點海馬CA1和CA3區(qū)錐體細(xì)胞的樹突分支；收集到的血液經(jīng)高速離心后取上清液并冷凍儲存于-80℃冰箱以便后續(xù)實驗；余應(yīng)激組與同齡對照組小鼠稱重后,先后用生理鹽水與4%多聚甲醛經(jīng)左心室(主動脈弓)灌注固定后分離腦組織存儲與-80℃冰箱；3、采用ELISACORT試劑盒檢測收集到的P9日齡小鼠血漿皮質(zhì)酮的含量；4、小鼠從第16周開始行相關(guān)的行為學(xué)實驗,P120日齡小鼠先完成行為學(xué)實驗再檢測樹突棘和突觸相關(guān)蛋白,最后對行為數(shù)據(jù)和樹突/突觸數(shù)據(jù)作相關(guān)檢驗統(tǒng)計學(xué)分析。該時間點行高爾基實驗的動物皆為雄性。小鼠行為學(xué)實驗需依次完成物體識別試驗、物體位置識別實驗、糖水偏好實驗和礦場實驗后行后續(xù)免疫組化實驗檢測P120日齡組小鼠海馬區(qū)興奮性突觸結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的支架蛋白,谷氨酸受體等,包括PSD-95, GluR1表達(dá)與分布。結(jié)果1、經(jīng)早期慢性應(yīng)激后的C57BL/6J幼鼠,在P2-P9天期間,1小時觀察時間內(nèi),每籠至少1只幼崽離巢時間明顯高于正常喂養(yǎng)同齡組幼鼠(P0.05),相同觀察時間內(nèi)母鼠出巢的次數(shù)明顯高于對照組(P0.05),而1小時觀察時間內(nèi),母鼠-幼崽的哺乳時間無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.1)；經(jīng)早期慢性應(yīng)激刺激后的幼鼠,在P2-9天體重增加明顯低于正常喂養(yǎng)組(P0.05),在P9和P21天,應(yīng)激組幼鼠的胸腺與體重比明顯低于對照組(P0.05),而雙側(cè)腎上腺與體重比無統(tǒng)計學(xué)意義；2, ELISA CORT試劑盒檢測結(jié)果顯示：應(yīng)激組小鼠P9天皮質(zhì)酮的含量顯著性高于對照組(P0.05)；3、應(yīng)激組和同齡對照組新鮮腦片行高爾基浸漬染色后,采用Image J軟件行Sholl分析,結(jié)果顯示：生長發(fā)育階段,環(huán)境改變影響幼鼠海馬錐體細(xì)胞的發(fā)育,導(dǎo)致神經(jīng)元樹突棘延后成熟,而且成熟樹突棘的數(shù)量減少,特別是成熟樹突棘的比例降低；4、P120(4月齡)應(yīng)激組小鼠1h后(測試短期記憶)物體識別指數(shù)顯著低于對照組(P0.05),且24h后(測試長期記憶)物體識別指數(shù)顯著低于對照組(P0.05),說明應(yīng)激組小鼠對物體認(rèn)知和記憶能力(長期)低于同齡對照組小鼠,同樣說明早期不良的應(yīng)激環(huán)境可穩(wěn)定導(dǎo)致機(jī)體認(rèn)知、記憶能力減弱至成年；應(yīng)激組糖水偏好分?jǐn)?shù)明顯低于對照組(P0.1),說明應(yīng)激組小鼠已經(jīng)開始出現(xiàn)“快感缺失”,但早期的不良應(yīng)激尚未使小鼠發(fā)生抑郁：礦場實驗結(jié)果表明,應(yīng)激組比對照組小鼠更易產(chǎn)生焦慮感,在自由探索問題上,應(yīng)激組小鼠顯得過于“呆滯、膽小”而不敢穿越中央?yún)^(qū),此外,應(yīng)激組小鼠情緒問題明顯多于對照組小鼠；5、P120日齡應(yīng)激組與對照組小鼠海馬神經(jīng)元錐體細(xì)胞區(qū)的突觸后致密帶(PSD-95)體積減少、GluR1表達(dá)在與記憶功能相關(guān)的樹突分支節(jié)段上減弱。結(jié)論早期應(yīng)激導(dǎo)致幼鼠的胸腺與體重比明顯低于非應(yīng)激鼠,應(yīng)激小鼠皮質(zhì)酮的含量顯著高于同年齡對照組；應(yīng)激還影響海馬錐體細(xì)胞的發(fā)育,導(dǎo)致神經(jīng)元樹突棘延后成熟,而且成熟樹突棘的數(shù)量減少,特別是成熟樹突棘的比例降低；早期應(yīng)激損害物體識別能力,而且機(jī)體認(rèn)知、記憶能力減弱可持續(xù)到成年；另外,應(yīng)激小鼠出現(xiàn)“快感缺失”等情緒方面的問題。這些變化可能與應(yīng)激導(dǎo)致的突觸后蛋白的改變相關(guān)�？偠灾�,當(dāng)幼年機(jī)體長期處于應(yīng)激狀態(tài)時,通過內(nèi)分泌軸(HPA-軸)和海馬邊緣結(jié)構(gòu)環(huán)路使海馬內(nèi)增高的應(yīng)激調(diào)節(jié)因子負(fù)性調(diào)節(jié)錐體細(xì)胞上樹突分子/樹突棘及其上的突觸發(fā)生改變或丟失,從而影響神經(jīng)纖維通路的正常建立和完善,最終導(dǎo)致認(rèn)知功能損害。
【關(guān)鍵詞】：發(fā)育 應(yīng)激 記憶 海馬
【學(xué)位授予單位】：長江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R338.64
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-12
• 第1章 緒論12-15
• 1.1 引言12-15
• 第2章 早期應(yīng)激影響C57鼠發(fā)育短期研究15-30
• 2.1 材料與方法15-24
• 2.2 結(jié)果24-28
• 2.3 結(jié)論28
• 2.4 討論28-30
• 第3章 早期應(yīng)激損害海馬學(xué)習(xí)記憶長效研究30-51
• 3.1 材料與方法31-40
• 3.2 結(jié)果40-49
• 3.3 結(jié)論49
• 3.4 討論49-51
• 動物使用及合格證明51-53
• 致謝53-54
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 綜述58-72
• 綜述一58-63
• 參考文獻(xiàn)61-63
• 綜述二63-72
• 參考文獻(xiàn)68-72
• 個人簡介72-73

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張妍;唐民科;張均田;;樹突棘與學(xué)習(xí)記憶[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2006年04期

2 張賽圣;程麗霞;呂誠;;肌動蛋白結(jié)合蛋白在神經(jīng)元樹突棘重塑中的作用[J];中國老年學(xué)雜志;2014年06期

3 肖穎;王倩;徐慕玲;李俊鳳;李兵;蔣錦昌;;亞磁環(huán)境孵化對雛雞厭惡性條件化記憶的影響及相關(guān)的樹突棘密度變化[J];中國科學(xué)(C輯:生命科學(xué));2009年04期

4 吳萍;于東明;;前突觸終末和樹突棘之間突觸連接的能動性研究[J];醫(yī)藥論壇雜志;2010年17期

5 汪遷;李楊;都思丹;;三維顯微圖像中神經(jīng)元樹突棘自動檢測與分析[J];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報;2014年02期

6 周琳娜;魏建峰;王芳;袁琳娜;王小麗;劉漢武;劉勝洪;;樹突棘素在大鼠小腦中的表達(dá)和年齡變化[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2007年01期

7 段明慧;盧習(xí);張偉;李玲玲;陳樹林;趙善廷;;子宮內(nèi)電擊轉(zhuǎn)染技術(shù)在神經(jīng)元樹突棘發(fā)育及神經(jīng)纖維歸巢研究中的應(yīng)用[J];中國免疫學(xué)雜志;2014年03期

8 何方;萬選才;;樹突棘及其可塑性研究的現(xiàn)狀[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;1986年02期

9 陳立波,薛靜波,趙麗麗,易紅英,趙書鵬;不同飼養(yǎng)條件對雞新紋狀體神經(jīng)細(xì)胞樹突棘的影響[J];青島醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年02期

10 陳立波;;飼養(yǎng)方式對雞紋狀體神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)的影響研究[J];中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志;2006年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 廖杰;劉深泉;;樹突棘中鈣信號的數(shù)值分析[A];中國力學(xué)學(xué)會學(xué)術(shù)大會'2009論文摘要集[C];2009年

2 郭陽;易詠紅;孫衛(wèi)文;蘇濤;廖衛(wèi)平;;FMR1基因敲除小鼠感覺皮質(zhì)管狀區(qū)神經(jīng)元樹突與樹突棘可塑性的研究[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

3 張博愛;;ephrin/Eph對樹突棘的調(diào)節(jié)研究進(jìn)展[A];經(jīng)濟(jì)策論（下）[C];2011年

4 崔慧先;李莎;康林;張超;;雙氫睪酮對SAMP8小鼠海馬樹突棘的快速影響及作用[A];中國解剖學(xué)會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

5 王國華;程玉芳;梁寶方;袁欣;徐江平;;抑郁癥小鼠海馬區(qū)BDNF表達(dá)和樹突棘密度的時間變化[A];第十五屆中國神經(jīng)精神藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2012年

6 孫衛(wèi)文;郭陽;易詠紅;;鈣結(jié)合蛋白Calbindin在FMR1基因敲除小鼠腦組織中的表達(dá)[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

7 張?zhí)K明;常麗英;梅愛農(nóng);梁燕玲;李羅清;殷小平;;8-溴環(huán)磷酸腺苷對腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)再生的影響[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

8 易詠紅;;mGluR激動或抑制對FMR1基因敲除小鼠培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹突棘形態(tài)和蛋白表達(dá)的影響[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

9 林杭;曹仁存;王慶松;吳渝憲;王偉文;;NMDA受體誘發(fā)神經(jīng)元樹突棘形態(tài)改變和AMPA受體移動到樹突棘的時間動態(tài)變化[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

10 李文琪;李剛;鄭歌;朱彥兵;張弛;王韻;;蛋白激酶D1對突觸形態(tài)發(fā)育的調(diào)控作用[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第九屆全國學(xué)術(shù)會議暨第五次會員代表大會論文摘要集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 王丹 通訊員 提蓮英;衰老過程中認(rèn)知力為何下降有新解[N];健康報;2012年

2 本報記者 華凌;多睡覺更聰明有了實證[N];科技日報;2014年

3 無雨 編譯;“過目不忘”小處練功[N];大眾科技報;2002年

4 劉海英;神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能機(jī)理揭曉[N];科技日報;2009年

5 本報記者 齊芳 詹媛;人類的大腦可“塑造”[N];光明日報;2012年

6 姜巖;過目不忘有“絕招”[N];安徽日報;2003年

7 記者姜巖;過目不忘有“絕招”[N];人民日報;2002年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 李超;電磁輻射對內(nèi)嗅相關(guān)空間學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 黃玉斌;非洲爪蟾嗅球中間神經(jīng)元樹突棘的活體成像[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2015年

3 任雯雯;激活α_(2A)-腎上腺素能受體促進(jìn)內(nèi)側(cè)前額葉皮層神經(jīng)元樹突棘的成熟[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

4 劉姝麗;手術(shù)對不同年齡大鼠認(rèn)知功能和神經(jīng)元樹突棘的影響[D];中南大學(xué);2014年

5 王磊;小鼠海馬CA1區(qū)軸棘突觸相關(guān)特性的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

6 龍歡;豬Dab1和Fyn基因的克隆、表達(dá)及調(diào)控細(xì)胞骨架重排的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙再華;鉛在大腦內(nèi)的分布及其對樹突棘可塑性影響的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 段明慧;子宮內(nèi)電擊轉(zhuǎn)染技術(shù)在樹突棘發(fā)育及神經(jīng)纖維歸巢研究中的應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

3 何云;早期應(yīng)激損害海馬學(xué)習(xí)記憶突觸功能機(jī)制研究[D];長江大學(xué);2016年

4 張楊;氟西汀對抑郁癥慢性不可預(yù)知應(yīng)激模型大鼠海馬結(jié)構(gòu)各亞區(qū)內(nèi)樹突棘作用的體視學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

5 王穎;海人酸致癇大鼠神經(jīng)元樹突棘的可塑性變化[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

6 張科學(xué);利用雙光子顯微鏡在體觀察脊髓半切后小鼠感覺皮層后肢代表區(qū)樹突棘的變化[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

7 崔占軍;孕期酒精暴露對小鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元樹突棘和突觸的影響[D];河南大學(xué);2010年

8 白易鑫;去甲腎上腺素α_(2A)受體在內(nèi)側(cè)前額葉皮層神經(jīng)元樹突棘發(fā)育中的作用[D];南昌大學(xué);2012年

9 賈賀;慢性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞樹突形態(tài)學(xué)變化及樹突棘密度的研究[D];鄭州大學(xué);2012年

10 劉婧;辣椒素保護(hù)應(yīng)激誘導(dǎo)的樹突棘丟失和記憶損傷[D];華中科技大學(xué);2011年

，

本文編號：860318