骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化能力可隨鼠齡增長而下降
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【摘要】:背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是理想的組織工程種子細(xì)胞來源,但是不同年齡的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖、分化特點(diǎn)有很大差異,有關(guān)年齡與骨髓間充質(zhì)干細(xì)數(shù)量的關(guān)系目前尚缺少系統(tǒng)研究。目的:觀察不同鼠齡大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化活性的差異。方法:通過全骨髓貼壁培養(yǎng)法,體外分離、純化、擴(kuò)增SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,倒置相差顯微鏡觀察形態(tài)學(xué)特點(diǎn),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)記,體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞分化并鑒定。取第3代2,4,6,8,12周齡和10,12月齡大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)1,2,3周,采用酶聯(lián)免疫法檢測骨鈣素含量。結(jié)果與結(jié)論:體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為貼壁生長,長梭形成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,可增殖形成克隆;流式細(xì)胞儀分析骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞CD29、CD90表達(dá)陽性,CD45表達(dá)陰性,CD44部分表達(dá);經(jīng)成骨分化誘導(dǎo),細(xì)胞堿性磷酸酶染色陽性,茜素紅染色陽性;經(jīng)成軟骨分化誘導(dǎo),阿利辛藍(lán)染色陽性,可見通過全骨髓貼壁法可成功地從大鼠骨髓中分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。通過不同鼠齡骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨分化后骨鈣素含量測定得出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化能力隨鼠齡的增長而下降。
【作者單位】: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 大鼠 Sprague-Dawley 骨鈣素 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 鼠齡 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 SD大鼠 鑒定 誘導(dǎo) 分化
【分類號】:R329
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):1通過形態(tài)學(xué)觀察,流式細(xì)胞儀鑒定,成骨誘導(dǎo)分化、成軟骨誘導(dǎo)分化及相關(guān)監(jiān)測指標(biāo)證實(shí),采用全骨髓貼壁法能夠成功地從SD大鼠骨髓中分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。2通過不同鼠齡SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨分化后骨鈣素含量測定得出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化能力隨鼠齡的
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