本文關(guān)鍵詞：臍動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)方法的改進

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【摘要】：目的:建立并優(yōu)化的人臍動脈血管平滑肌細胞(VSMCs)的體外培養(yǎng)方法。方法:人臍動脈VSMCs的體外原代培養(yǎng)應(yīng)用優(yōu)化的組織塊貼壁法進行。在分別應(yīng)用傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)法和優(yōu)化后細胞培養(yǎng)法貼壁培養(yǎng)提取的原代細胞10 d后,計數(shù)6孔板每孔細胞數(shù)目,并做統(tǒng)計比較分析相同時間內(nèi)原代細胞的數(shù)量。以抗α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)抗體和抗CD31抗體進行免疫熒光染色和倒置相差顯微鏡觀察鑒定培養(yǎng)的細胞。結(jié)果:與傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)法相比,在相同的時間周期內(nèi)優(yōu)化實驗方法后培養(yǎng)的原代細胞數(shù)量較傳統(tǒng)多,我們可以在較短時間內(nèi)得到實驗所需的細胞量,因此優(yōu)化后可縮短細胞的培養(yǎng)周期。原代和傳代培養(yǎng)的臍動脈VSMCs生長良好,細胞經(jīng)凍存、復(fù)蘇后狀態(tài)依然良好。光鏡下細胞呈典型的"峰-谷"樣生長,細胞多為長梭形,具有VSMCs的特征,且傳代培養(yǎng)至第7代,細胞生長特性不變。經(jīng)抗α-SMA、CD31抗體進行免疫熒光染色鑒定證實為VSMCs。結(jié)論:優(yōu)化的組織塊貼壁法可縮短原代人臍動脈VSMCs的培養(yǎng)周期,且細胞的生物學(xué)特性較穩(wěn)定,為與平滑肌相關(guān)的疾病進展及心血管生長發(fā)育的研究奠定了實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院中醫(yī)科;第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 人臍動脈 血管平滑肌細胞 原代細胞培養(yǎng)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 在體外細胞實驗中,人血管平滑肌細胞(VSMCs)的體外分離和培養(yǎng)一直難度較大,致使許多針對與平滑肌相關(guān)疾病的發(fā)生及演變機制的體外基礎(chǔ)研究受限。人臍帶不僅來源充沛、取材簡單,而且其臍動脈VSMCs的活力強較適合培養(yǎng)。人臍帶由兩條動脈和一條靜脈組成。臍動脈有3層膜形成,內(nèi)膜

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本文編號：821098