本文關(guān)鍵詞：臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)方法的改進(jìn)

  更多相關(guān)文章： 人臍動(dòng)脈 血管平滑肌細(xì)胞 原代細(xì)胞培養(yǎng)

【摘要】：目的:建立并優(yōu)化的人臍動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的體外培養(yǎng)方法。方法:人臍動(dòng)脈VSMCs的體外原代培養(yǎng)應(yīng)用優(yōu)化的組織塊貼壁法進(jìn)行。在分別應(yīng)用傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)法和優(yōu)化后細(xì)胞培養(yǎng)法貼壁培養(yǎng)提取的原代細(xì)胞10 d后,計(jì)數(shù)6孔板每孔細(xì)胞數(shù)目,并做統(tǒng)計(jì)比較分析相同時(shí)間內(nèi)原代細(xì)胞的數(shù)量。以抗α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)抗體和抗CD31抗體進(jìn)行免疫熒光染色和倒置相差顯微鏡觀察鑒定培養(yǎng)的細(xì)胞。結(jié)果:與傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)法相比,在相同的時(shí)間周期內(nèi)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方法后培養(yǎng)的原代細(xì)胞數(shù)量較傳統(tǒng)多,我們可以在較短時(shí)間內(nèi)得到實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞量,因此優(yōu)化后可縮短細(xì)胞的培養(yǎng)周期。原代和傳代培養(yǎng)的臍動(dòng)脈VSMCs生長良好,細(xì)胞經(jīng)凍存、復(fù)蘇后狀態(tài)依然良好。光鏡下細(xì)胞呈典型的"峰-谷"樣生長,細(xì)胞多為長梭形,具有VSMCs的特征,且傳代培養(yǎng)至第7代,細(xì)胞生長特性不變。經(jīng)抗α-SMA、CD31抗體進(jìn)行免疫熒光染色鑒定證實(shí)為VSMCs。結(jié)論:優(yōu)化的組織塊貼壁法可縮短原代人臍動(dòng)脈VSMCs的培養(yǎng)周期,且細(xì)胞的生物學(xué)特性較穩(wěn)定,為與平滑肌相關(guān)的疾病進(jìn)展及心血管生長發(fā)育的研究奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院中醫(yī)科;第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 人臍動(dòng)脈 血管平滑肌細(xì)胞 原代細(xì)胞培養(yǎng)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,人血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的體外分離和培養(yǎng)一直難度較大,致使許多針對(duì)與平滑肌相關(guān)疾病的發(fā)生及演變機(jī)制的體外基礎(chǔ)研究受限。人臍帶不僅來源充沛、取材簡單,而且其臍動(dòng)脈VSMCs的活力強(qiáng)較適合培養(yǎng)。人臍帶由兩條動(dòng)脈和一條靜脈組成。臍動(dòng)脈有3層膜形成,內(nèi)膜

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：821098