本文關(guān)鍵詞：THP-1單核細(xì)胞不同轉(zhuǎn)染方法的比較

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【摘要】：背景:人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞是典型的懸浮細(xì)胞系,其轉(zhuǎn)染并瞬時(shí)表達(dá)外源蛋白比一般貼壁細(xì)胞相對困難。其中DEAE-葡聚糖介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法雖然建立較早,但在國內(nèi)應(yīng)用很少。目的:采用不同質(zhì)粒轉(zhuǎn)染方法介導(dǎo)質(zhì)粒綠色熒光蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒(pEGFP-N1)轉(zhuǎn)染人THP-1單核細(xì)胞,以獲得較高轉(zhuǎn)染效率的方法。方法:分別采用DEAE-葡聚糖、Lipofectamine 2000、FuGENE 6、梭華-Sofast轉(zhuǎn)染試劑不同方法介導(dǎo)質(zhì)粒綠色熒光蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染,測定不同方法的轉(zhuǎn)染效率、及其對細(xì)胞活力的影響。結(jié)果與結(jié)論:熒光顯微鏡下觀察及流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果均顯示DEAE-Dextran介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染效率最高,Lipfectamine 2000脂質(zhì)體次之,FuGENE 6和梭華-Sofast則明顯低于前二者。將質(zhì)粒綠色熒光蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒體外成功轉(zhuǎn)染人THP-1單核細(xì)胞中,通過優(yōu)化轉(zhuǎn)染方法提高轉(zhuǎn)染效率、降低對細(xì)胞活力的影響。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院老年病科;
【關(guān)鍵詞】： 單核細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 質(zhì)粒 組織構(gòu)建 組織工程 轉(zhuǎn)染效率 THP-單核細(xì)胞 DEAE-葡聚糖 脂質(zhì)體 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30471921) 湖北省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2013CFB073)~~
【分類號】：R3416
【正文快照】： 0引言Introduction人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞是典型的懸浮細(xì)胞系,其轉(zhuǎn)染并瞬時(shí)表達(dá)外源蛋白比一般貼壁細(xì)胞相對困難,可能是因?yàn)榧?xì)胞間膜結(jié)構(gòu)的差異,但目前在分子水平上對其機(jī)制并無合理解釋[1-3]。細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法主要有電穿孔、磷酸鈣、脂質(zhì)體載體、DEAE-葡聚糖介導(dǎo)、基因顯微注

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本文編號：808382