本文關(guān)鍵詞：抗弓形蟲SAG2蛋白單克隆抗體的制備及其免疫學(xué)特性鑒定

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【摘要】：為制備抗弓形蟲SAG2蛋白的單克隆抗體(McAb),用純化的rSAG2蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取其脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,經(jīng)間接ELISA方法篩選穩(wěn)定分泌高效價(jià)McAb的雜交瘤細(xì)胞株,體內(nèi)誘生腹水法制備單抗。用ELISA方法測(cè)定其效價(jià);單克隆抗體類型鑒定試紙條鑒定其類型;Western-blot和IFA試驗(yàn)進(jìn)行特異性鑒定。結(jié)果顯示,篩選出2株能穩(wěn)定分泌抗SAG2蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別被命名為5E2、2A8。間接ELISA測(cè)定其效價(jià)分別為1∶256 000、1∶128 000;2株單克隆抗體亞型均為IgG1型,輕鏈均為κ鏈;Western-blot與IFA試驗(yàn)表明,這2株McAb均能夠特異性識(shí)別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,并且進(jìn)一步說(shuō)明此蛋白是位于弓形蟲膜表面的蛋白。成功獲得了具有較高特異性及敏感性的抗SAG2蛋白的單克隆抗體,并能特異性識(shí)別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,為弓形蟲病免疫診斷及基因工程亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 SAG 單克隆抗體
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(200803017)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 弓形蟲病是一種呈世界性分布且嚴(yán)重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病。孕婦感染弓形蟲后,可導(dǎo)致流產(chǎn)、畸胎、死胎或智力發(fā)育不全;免疫抑制或免疫缺陷患者感染弓形蟲后,可引起弓形蟲性腦炎、弓形蟲性視網(wǎng)膜脈絡(luò)炎等,嚴(yán)重者可致死。此外,弓形蟲也可引起家畜的高熱、呼吸系統(tǒng)及消

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本文編號(hào)：808007