本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用于抗體藥物捕獲的耐堿親和層析介質(zhì)性能的比較

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【摘要】：目的比較應(yīng)用于抗體藥物捕獲的耐堿的4種蛋白A親和層析介質(zhì)和2種小分子親和層析介質(zhì)的性能,為單抗純化工藝的選擇提供參考。方法利用兩種單抗純品(mAb1和mAb2)測定4種蛋白A親和層析介質(zhì)MabSelectSuRe、POROS MabCaptureA、Absolute High Cap、TOYOPEARL AF-rProtein A-650F和2種小分子親和層析介質(zhì)Mabsorbent A2P HF、Fabsorbent F1P HF在停留時間分別為4、6、8 min時的動態(tài)載量;利用含mAb2的發(fā)酵液,從回收率和雜質(zhì)去除方面比較6種親和層析介質(zhì)的純化效果。結(jié)果在5%穿透點(diǎn),各介質(zhì)對mAb1和mAb2的動態(tài)載量在35~73 g/L之間。小分子親和層析介質(zhì)Mabsorbent A2P HF純化mAb2的回收率為89%,其他5種介質(zhì)純化mAb2的回收率均≥96%;6種介質(zhì)純化mAb2的宿主細(xì)胞蛋白(host cell protein,HCP)在2 000 ppm之內(nèi),蛋白A殘留量在20 ppm之內(nèi)。結(jié)論結(jié)合流速、動態(tài)載量、回收率和雜質(zhì)去除效果等指標(biāo),可從6種親和層析介質(zhì)中挑選適用于抗體類藥物下游純化工藝的耐堿型蛋白A或小分子親和介質(zhì)。
【作者單位】： 珠海市麗珠單抗生物技術(shù)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 單克隆抗體 純化 親和層析 介質(zhì)
【分類號】：O657.73;R392-33
【正文快照】： 近年來,抗體藥物發(fā)展迅速。2012年,全球銷售額前10位的藥物中有6個是抗體藥物,且前3位均是以腫瘤壞死因子α為靶點(diǎn)的抗體藥物[1]。抗體藥物的純化通常采用經(jīng)典的三步層析法[2],而蛋白A親和介質(zhì)以蛋白A配基上多個區(qū)域?qū)贵wFc段獨(dú)特的專一吸附能力[3],用作抗體捕獲,一步工藝即

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本文編號：801490