本文關(guān)鍵詞：羥丙基甲基纖維素在臍血干細(xì)胞分離中應(yīng)用

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【摘要】：目的探討羥丙基甲基纖維素在人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)分離中應(yīng)用的可行性及分離效果。方法對(duì)臍血樣本先用生理鹽水稀釋,然后分別加入3種不同沉降因子(羥丙基甲基纖維素,明膠和羥乙基淀粉),血液、生理鹽水、沉降因子比例為2:1:3,混勻后靜置至界面分層清晰時(shí)記錄時(shí)間;用Percoll液對(duì)上清液進(jìn)一步分離,計(jì)數(shù)回收MSCs量與存活數(shù);將MSCs進(jìn)行培養(yǎng)、傳代,傳到第3、20代及液氮凍存6個(gè)月后復(fù)蘇再傳至35代時(shí)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD44、CD90、CD105,CD34、CD45表達(dá)。結(jié)果羥丙基甲基纖維素沉降紅細(xì)胞速度最快,僅需15 min,明膠和羥乙基淀粉均需要30 min左右,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);0.1%~0.3%羥丙基甲基纖維素對(duì)臍血MSCs回收量在(6.24~6.72)×106個(gè)/m L,高于4%~8%羥乙基淀粉對(duì)臍血MSCs回收量[(5.12~6.88)×106個(gè)/m L)],明顯高于0.3%~0.6%明膠對(duì)臍血MSCs回收量[(2.08~2.56)×106/m L)],差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);羥丙基甲基纖維素回收MSCs的存活率最高,高于明膠和羥乙基淀粉,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);用羥丙基甲基纖維素分離、培養(yǎng)的MSCs傳到第3、20代及液氮凍存6個(gè)月復(fù)蘇后傳到第35代,CD44、CD90、CD105表達(dá)均呈陽性,CD34、CD45表達(dá)呈陰性,符合干細(xì)胞表面標(biāo)志特征。結(jié)論羥丙基甲基纖維素可以用于臍帶血MSCs分離(最適宜濃度為0.2%),效果優(yōu)于常用的分離試劑明膠和羥乙基淀粉。
【作者單位】： 沈陽軍區(qū)202醫(yī)院;沈陽醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 臍帶血 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs) 沉降因子 羥丙基甲基纖維素
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是目前倍受關(guān)注的一類具有自我更新能力和多向分化潛能的組織干細(xì)胞,可以從骨髓、肝臟、脂肪等組織獲得。MSCs雖然來源于中胚層,但在特定條件下,可分化為各胚層的多種細(xì)胞或組織[1~4],如骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)

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本文編號(hào)：798175