本文關鍵詞：腸出血型大腸埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的構建及其生物學特性分析

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【摘要】：目的利用Red重組系統(tǒng)構建腸出血型大腸埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法設計并合成一對同源臂引物,每條引物5'端與ppk基因同源,3'端與卡那霉素抗性基因同源,擴增卡那霉素抗性基因片段;制備含有pKD46質粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受態(tài)細菌,然后將該抗性基因片段電擊轉化入制備的感受態(tài)菌株中;利用pKD46介導的Red重組系統(tǒng),通過同源重組替換EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和測序驗證;通過革蘭染色、測D600值、吉姆薩染色比較EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突變株的形態(tài)結構、生長能力和黏附性。結果構建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突變菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突變株的生物學特性。結論本研究運用Red重組系統(tǒng)構建了腸出血型大腸埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,為進一步研究腸出血型大腸埃希菌中ppk基因的調控機制奠定了基礎。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學學院BSL-3實驗室;
【關鍵詞】： EHECO H ppk基因 Red重組系統(tǒng) 基因突變
【基金】：國家自然科學基金(81371765) 廣東省自然科學基金(S2013010014393)~~
【分類號】：R378.21;R3416
【正文快照】： 腸出血型大腸埃希菌(enterohemorrhagicEscherichia coli,EHEC)O157:H7可引起人出血性結腸炎(hemorrhagic colitis,HC)、溶血性尿毒綜合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)以及血栓形成性血小板減少性紫癜(thrombotic thrombocytopenicpurpura,TTP)等[1]。在大腸埃希菌中,多聚

【參考文獻】

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1 王恒，

本文編號：796336