本文關(guān)鍵詞：人胎盤不同組織分離間充質(zhì)干細胞的生物學特性

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【摘要】：背景:胎盤間充質(zhì)干細胞來源穩(wěn)定,正逐漸成為廣受關(guān)注的再生醫(yī)學種子細胞來源。目的:比較從胎盤組織絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層分離獲取人胎盤間充質(zhì)干細胞生物學特性的差異。方法:手術(shù)剪剝離人胎盤表面羊膜,分別剪取胎兒側(cè)的絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層組織機械破碎后,分別加含Ⅱ型膠原酶的PBS消化液消化,分離為單個核細胞,用含有體積分數(shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基在37℃、體積分數(shù)5%CO2、95%飽和濕度下培養(yǎng),48 h后全量換液,去除非貼壁細胞,添加新鮮培養(yǎng)基,當細胞融合90%左右時,胰酶傳代。通過觀察原代細胞總數(shù),細胞生長形態(tài),以及間充質(zhì)干細胞表面標記CD90、CD73、CD105的流式細胞測定結(jié)果比較從不同胎盤組織分離獲得胎盤間充質(zhì)干細胞的差異。結(jié)果與結(jié)論:流式細胞儀測定結(jié)果顯示,從絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層中分離得到細胞間充質(zhì)干細胞表面標記CD90、CD73以及CD105的陽性率都在90%以上,兩種來源的細胞生長都呈現(xiàn)典型的成纖維細胞形態(tài),這表明絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層中分離得到細胞都具有間充質(zhì)干細胞的特性。提示消化時間相同,酶濃度相同,以及搖床轉(zhuǎn)速相同的情況下,可從絨毛膜中可以得到更多的細胞,對于后續(xù)培養(yǎng)更易獲得較多的細胞。
【作者單位】： 上海市臍帶血造血干細胞庫 中國干細胞集團上海生物科技有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 干細胞 胎盤 間質(zhì)干細胞 絨毛膜 膠原酶類 培養(yǎng) 間充質(zhì)干細胞 絨毛滋養(yǎng)層 Ⅱ型膠原酶 流式細胞儀 CD CD CD
【基金】：上海市臍帶血造血干細胞庫對于實驗過程給予資金支持
【分類號】：R321
【正文快照】： 文章亮點:1文章創(chuàng)新性取材于人胎盤組織的不同部位——絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層,為今后胎盤干細胞的研究中對于胎盤的處理提供了一定的依據(jù),今后進行胎盤干細胞的分離應主要取材于絨毛膜,盡量減少受絨毛滋養(yǎng)層的影響。2實驗比較了從絨毛膜與絨毛滋養(yǎng)層分離得到細胞的生長特性以及間

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