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兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的不同培養(yǎng)方法

發(fā)布時(shí)間:2017-09-01 15:16

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【摘要】:背景:目前傳統(tǒng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法是應(yīng)用異種血清為培養(yǎng)基,但其存在種間疾病傳播、潛在免疫排斥反應(yīng)甚至是倫理學(xué)爭(zhēng)議等問(wèn)題;且與衛(wèi)生部公布的《組織工程化組織移植治療技術(shù)管理規(guī)范》的要求相違背。自體富血小板血漿是生物自體的全血提取物,內(nèi)含多種且含量豐富的生長(zhǎng)因子。目的:使用自體富血小板血漿替代傳統(tǒng)異種血清,探討其對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞的影響,方法:從兔髂后上棘穿刺抽出8 mL骨髓并加肝素抗凝,密度梯度離心富集骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,分為自體富血小板血漿組、胎牛血清組,分別加入含10%自體富血小板血漿、體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清。在傳至4代時(shí)將自體富血小板血漿組和胎牛血清組細(xì)胞各自分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組對(duì)培養(yǎng)及成分進(jìn)行改變;對(duì)照組培養(yǎng)基不變。通過(guò)生長(zhǎng)曲線測(cè)定各代細(xì)胞的增殖情況;通過(guò)對(duì)各組細(xì)胞進(jìn)行堿性磷酸酶活性測(cè)定,判斷其成骨分化狀況。結(jié)果與結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線可見(jiàn)各代細(xì)胞增殖良好。對(duì)第4代各組細(xì)胞進(jìn)行堿性磷酸酶活性檢測(cè),培養(yǎng)第12天,第4代自體富血小板血漿實(shí)驗(yàn)組及胎牛血清實(shí)驗(yàn)組的堿性磷酸酶活性均顯著高于其相應(yīng)對(duì)照組;自體富血小板血漿組對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組堿性磷酸酶活性顯著高于胎牛血清組的對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組,差異有顯著性意義(P0.01)。提示使用自體富血小板血漿替代異種血清培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種安全可靠、操作簡(jiǎn)單、純度活性高的誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化方法。
【作者單位】: 冀中能源邢臺(tái)礦業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院急診科;天津市第四中心醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】干細(xì)胞 間質(zhì)干細(xì)胞 富血小板血漿 幼牛血清 骨髓干細(xì)胞 自體富血小板血漿 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 胎牛血清 生長(zhǎng)曲線
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):1實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)在于:采用來(lái)源廣泛的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化;對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的多種方法進(jìn)行比較;使用自體富血小板血漿替代異種血清培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,使用自體富血小板血漿替代異種血清培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭有華;何滔;匡世軍;張志光;蘇凱;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性[J];國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào);2010年02期

2 高悠水;朱珍宏;胡斌;于曉巍;王信富;張長(zhǎng)青;;低氧張力下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與成骨分化特點(diǎn)及研究進(jìn)展[J];國(guó)際骨科學(xué)雜志;2011年05期

3 王斌;羅毅文;胡年宏;;補(bǔ)腎填精法對(duì)兔骨折后不同時(shí)相骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年01期

4 曹鈺;杜娟;范志朋;;BCOR基因敲除促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的研究[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2013年02期

5 張寧;李放;羅濤;;不同抗凝劑和激活劑組合在自體富血小板血漿凝膠支架促進(jìn)脂肪干細(xì)胞增殖的影響[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2012年06期

6 王悅;楊旭芳;周延民;趙靜輝;朱U,

本文編號(hào):772831


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