發(fā)布時(shí)間：2017-09-01 00:12

  本文關(guān)鍵詞：幼兔髂骨穿刺抽取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定:注意的細(xì)節(jié)與技術(shù)

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【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞被認(rèn)為是構(gòu)建組織工程骨修復(fù)骨與軟骨缺損中較為常用的種子細(xì)胞,在其基本操作過程中注意常見問題并及時(shí)避免,對(duì)后期細(xì)胞學(xué)及組織工程學(xué)實(shí)驗(yàn)很有意義。目的:通過作者實(shí)驗(yàn)操作過程中所遇問題的總結(jié)和分析,為初學(xué)者和科研人員提供可靠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定方法,減少操作過程中的人為失誤和易犯問題。方法:取16只幼年新西蘭大白兔作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,進(jìn)行髂骨穿刺抽取骨髓液。采用密度梯度離心法聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法體外篩選純化細(xì)胞,并且通過倒置相差顯微鏡觀察其形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、生長曲線和流式細(xì)胞術(shù)鑒定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表型。結(jié)果與結(jié)論:實(shí)驗(yàn)過程中前5只兔骨髓抽吸、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離過程中遇到不同的問題和困難,經(jīng)認(rèn)真總結(jié)和分析,后11只兔骨髓抽吸、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離均獲成功,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染和細(xì)胞老化,第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD44抗原,而CD14、CD34抗原低表達(dá),MTT測細(xì)胞生長曲線顯示P3和P5增殖活性較高。盡管骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定技術(shù)已較為成熟,但是如果操作過程中不注意細(xì)節(jié)問題,也將會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)困難重重或失敗。嚴(yán)格執(zhí)行常規(guī)操作步驟可以得到純度較高的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,提高成功率,為后續(xù)相關(guān)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備。
【作者單位】： 濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院脊柱外科;濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院病理教研室;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 間質(zhì)干細(xì)胞 骨髓 抗原 表面 細(xì)胞增殖 骨髓干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 種子細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 表型鑒定 兔 山東省自然科學(xué)基金
【基金】：山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(ZR2010HM090)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction骨髓組織中除含有造血干細(xì)胞外,還含有少量的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[1]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的存在為骨與軟骨組織的損傷提供了潛在的修復(fù)能力[2]。間充質(zhì)干細(xì)胞分離獲得多來自骨髓間質(zhì),在新鮮的骨髓中含量很少,占骨髓單核細(xì)胞總數(shù)的1/104-1/105,并隨年齡的增加而減

【共引文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：768750