發(fā)布時間：2017-08-31 19:00

  本文關鍵詞：人巨細胞病毒即刻早期基因功能研究

  更多相關文章： 人巨細胞病毒 即刻早期基因 干擾RNA 基因表達

【摘要】：目的探討人巨細胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)在體外增殖過程中即刻早期(immediately early,IE)基因的作用。方法設計并化學合成3條靶向IE基因外顯子序列的siRNA,應用陽離子脂質體法將干擾序列轉染入人胚肺成纖維(human embryonic lung fibroblast,HELF)細胞,用HCMV感染已轉染入siRNA的細胞,同時設置正常對照組、陰性對照組、陽性對照組和轉染試劑對照組。采用流式細胞術檢測轉染效果,熒光定量PCR和瓊脂糖凝膠電泳方法檢測分析導入的siRNA對IE基因和GAPDH陽性對照基因的抑制效果以及早期(E)基因和晚期(L)基因的表達情況。結果 siRNA成功導入HELF細胞內,6孔板內5μl脂質體可導入的最佳siRNA量約為100pmol,陽性對照組GAPDH表達量較其他對照組有明顯的下降(P0.05),抑制率為70.8%;干擾組中3條siRNA對IE基因的表達均有抑制作用。IE基因表達下調后,E基因和L基因的表達較對照組也有明顯下降(P0.05)。結論在體外,靶向IE基因的siRNA能有效抑制IE基因的表達從而影響E基因和L基因的表達,表明IE基因的有效表達是E基因和L基因表達的基礎。
【作者單位】： 江蘇大學臨床醫(yī)學院;鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院兒科;
【關鍵詞】： 人巨細胞病毒 即刻早期基因 干擾RNA 基因表達
【基金】：江蘇省自然科學基金資助項目(BK 2008238)
【分類號】：R373
【正文快照】： 人巨細胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是雙鏈DNA病毒,在人群中感染十分普遍,近年來已成為引起新生兒先天性疾病和畸形的重要因素之一,但其致病機制仍不甚明了[1~4]。HCMV基因在細胞內的表達具有一定的時序性,按表達的先后順序可分為即刻早期(immediately early,IE)基因、

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