本文關(guān)鍵詞：多種PEG化重組人生長(zhǎng)激素中蛋白含量測(cè)定的通用型方法的建立

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【摘要】：目的:通過(guò)以未修飾的原型蛋白為對(duì)照品,建立準(zhǔn)確測(cè)定多種聚乙二醇化重組人生長(zhǎng)激素(PEG-rhGH)中蛋白含量的通用型方法。方法:采用rhGH國(guó)家對(duì)照品和凝膠色譜法測(cè)定PEG-rhGH中的蛋白含量。通過(guò)詳細(xì)的專(zhuān)屬性、精密度、準(zhǔn)確性等方法學(xué)考察,建立該方法。色譜條件:采用TSKGel 3000SWxl(300 mm×7.8mm)凝膠色譜柱,以0.05 mol·L-1的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉(pH7.0)為流動(dòng)相,流速為0.6 mL·min-1,柱溫為室溫,檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm。通過(guò)將測(cè)定結(jié)果與申報(bào)企業(yè)原有方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì),對(duì)現(xiàn)有含量測(cè)定方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果:由于PEG與蛋白質(zhì)之間的連接子存在雙鍵,在214 nm下,3種PEG-rhGH的測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性較差,平均回收率(n=9)分別為109.3%、109.9%、110.6%;而在280 nm下,rhGH在200~1800μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9999),3種PEG-rhGH的平均回收率(n=9)分別為101.2%、101.7%、100.4%。結(jié)果比對(duì)中發(fā)現(xiàn),新建方法與企業(yè)申報(bào)方法中采用同質(zhì)對(duì)照品的HPLC法測(cè)定結(jié)果相當(dāng),但與以BSA為對(duì)照品的Lowry法測(cè)定結(jié)果相差較大。結(jié)論:本方法專(zhuān)屬性、精密度和準(zhǔn)確性良好,可作為多種PEG-rhGH含量測(cè)定的通用型方法。
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院;武漢大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 聚乙二醇化重組人生長(zhǎng)激素(PEG-rhGH) 重組人生長(zhǎng)激素國(guó)家對(duì)照品 原型蛋白 凝膠色譜 高效液相色譜 方法驗(yàn)證
【基金】：“重大新藥創(chuàng)制”科技部重大專(zhuān)項(xiàng)課題“生物技術(shù)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制技術(shù)平臺(tái)(No.2012ZX09304010) 中檢院學(xué)科帶頭人基金項(xiàng)目“PEG修飾藥物質(zhì)控關(guān)鍵技術(shù)與方法的標(biāo)準(zhǔn)化研究”(No.2011X1)
【分類(lèi)號(hào)】：R3411
【正文快照】： 重組人生長(zhǎng)激素(recombinant human growthhormone,rhGH)是治療兒童及成人身材矮小、發(fā)育遲緩的特效藥。由于其半衰期較短,需要每日注射以獲得最大療效[1-2],因此病人,特別是兒童的依從性較低,大約有1/4的兒童每周錯(cuò)過(guò)2次rhGH注射治療[3]。而聚乙二醇化重組人生長(zhǎng)激素則通過(guò)將

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 尹路,許寶華,李維勤,顧軍,陳昶,任建安,黎介壽;重組人生長(zhǎng)激素在腸瘺伴低白蛋白血癥病人中前瞻性應(yīng)用研究[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);1998年01期

2 劉曉宏,粟永萍,王蒙,李淑蓉,艾國(guó)平,王軍平,李廣闊,程天民;大腸桿菌表達(dá)重組人生長(zhǎng)激素的純化[J];氨基酸和生物資源;2002年04期

3 馬自蘭,吳中華,周蓬蓬,何曉淮,姚紅誼;Lowry蛋白定量法用于重組人生長(zhǎng)激素定量上的差異[J];生物學(xué)雜志;1998年03期

4 楊化新，張培培，徐康森;重組人生長(zhǎng)激素中宿主蛋白的點(diǎn)─免疫結(jié)合測(cè)定法[J];藥物分析雜志;1995年02期

5 宋禮華,桂向東,范清林,魏躍武,姚紅誼,王榮海,傅永標(biāo),楊少民,康勇;分泌型重組人生長(zhǎng)激素的研制[J];生物學(xué)雜志;1999年01期

6 馬\~;王德全;崔行;胡曉燕;;rhGH的受體結(jié)合活性研究[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1991年02期

7 徐一洲;黃煌;曹s，

本文編號(hào)：745423