本文關(guān)鍵詞：小鼠胚胎成纖維細胞的分離培養(yǎng)及飼養(yǎng)層制備

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【摘要】：背景:建立一種既可以大量制備,又易于保存并保持較高活性的飼養(yǎng)層細胞是人胚胎干細胞培養(yǎng)研究的重要環(huán)節(jié)。目的:建立昆明小鼠胚胎成纖維細胞的最佳分離培養(yǎng)方法,評價其用于人胚胎干細胞飼養(yǎng)層研究的可行性。方法:用不同濃度胰蛋白酶分步消化法體外分離和培養(yǎng)昆明小鼠胚胎成纖維細胞,觀察其生物學(xué)特性,制備胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層,檢測人胚胎干細胞在飼養(yǎng)層上培養(yǎng)的生長狀態(tài)。結(jié)果與結(jié)論:制備昆明小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層的最佳胎齡為13.5 d。不同濃度胰蛋白酶分步消化法制備的胚胎成纖維細胞生長狀態(tài)好,獲得的成纖維細胞純度高,增殖活躍。凍存2周,1,3,6個月內(nèi)復(fù)蘇的細胞存活率差異無顯著性意義。小鼠胚胎成纖維細胞在第2-4代增殖旺盛,第5代以后細胞增殖活力明顯下降。人胚胎干細胞在小鼠胚胎成纖維細胞長期傳代后呈典型的未分化形態(tài),堿性磷酸酶和過碘酸-雪夫染色均為陽性。結(jié)果表明建立的昆明小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層分離培養(yǎng)法可為人胚胎干細胞擴增提供穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)的飼養(yǎng)層細胞。
【作者單位】： 連云港市婦幼保健院檢驗科;江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 胚胎干細胞 成纖維細胞 滋養(yǎng)層 干細胞 培養(yǎng) 人胚胎干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞 飼養(yǎng)層 國家自然科學(xué)基金
【基金】：江蘇大學(xué)高級人才專項資助(09JDG037) 國家自然科學(xué)基金資助項目(31071421)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 江蘇省東海縣人,漢族,2012年江蘇大學(xué)畢業(yè),碩士,主要從事干細胞方面的研究。通訊作者:胡嘉波,博士,教授,江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院,江蘇省鎮(zhèn)江市2120132014.45.017[http://www.crter.org](2014)45-07306-06稿件接受:2014-10-19Hu San-qiang,Master,Department of ClinicalLaboratory,Lia

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5 袁s，

本文編號：733043