本文關鍵詞：抗沙眼衣原體MIP蛋白單克隆抗體的制備及特性鑒定

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【摘要】：目的:制備小鼠抗沙眼衣原體MIP蛋白單克隆抗體并鑒定其生物學特性。方法:重組MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行常規(guī)融合,間接ELISA法篩選陽性克隆并進行有限稀釋克隆化,建立分泌抗MIP蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株,進一步采用ELISA法鑒定單克隆抗體的效價、類別及抗MIP蛋白特異性,IFA法鑒定單克隆抗體的衣原體種屬特異性及中和能力。結果:建立了2株能穩(wěn)定分泌抗MIP蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法測得培養(yǎng)上清效價均為1:1 600,免疫球蛋白類型分別為IgG2a和IgG1;2株單克隆抗體不僅能特異性的識別MIP重組蛋白,而且能特異性識別沙眼衣原體血清型A、D、L2所編碼的內源性MIP蛋白,但不識別其他衣原體優(yōu)勢蛋白及MoPn、AR39和6BC;體外中和試驗表明,2株單克隆抗體均能有效中和衣原體的感染性。結論:獲得了有活性的能特異性識別MIP蛋白的單克隆抗體,為深入研究MIP蛋白的結構和功能奠定了基礎。
【作者單位】： 南華大學醫(yī)學院病原生物學研究所;南華大學醫(yī)學院腫瘤研究所;
【關鍵詞】： 沙眼衣原體 MIP蛋白 單克隆抗體 鑒定
【基金】：國家自然科學基金(No.81202374) 湖南省自然科學基金(No.12JJ3113) 湖南省高校科技創(chuàng)新團隊(湘教通[2010]212號)等基金資助
【分類號】：R392.7
【正文快照】： 沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,Ct)是嚴格真核細胞內寄生的革蘭氏陰性細菌,根據(jù)主要外膜蛋白MOMP抗原性的不同,可分為19個血清型。其中A、B、Ba、C型主要感染眼結膜上皮細胞引起沙眼,D-K型主要感染生殖道黏膜上皮細胞引起性傳播疾病。隨著人類生活水平的提高和居住環(huán)境的

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本文編號：730628