發(fā)布時(shí)間：2017-08-21 10:15

  本文關(guān)鍵詞：耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白合成及人群IgG抗體調(diào)查

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【摘要】：目的原核表達(dá)耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)主要表面糖蛋白(major surface glycoprotein,Msg)氨基端片段,獲得可溶性Pj重組Msg抗原(recombinant Msg,rMsg),利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗體。方法從耶氏肺孢子菌感染者的痰液獲得Pj DNA,構(gòu)建表達(dá)載體pGEX-3X-Pj Msg,轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸埃希菌DE3,用異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)。利用谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)標(biāo)簽進(jìn)行親和純化,對(duì)純化Pj rMsg抗原進(jìn)行鑒定并建立ELISA方法,檢測266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗體。結(jié)果成功構(gòu)建了表達(dá)質(zhì)粒pGEX-3X-Pj Msg,并誘導(dǎo)表達(dá)分子質(zhì)量單位約39ku的可溶性Pj rMsg蛋白,產(chǎn)量為13mg/500ml菌液,以此為抗原,采用ELISA檢測266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗體,陽性率為42.5%(113/266)。其中男、女性患者陽性率分別為43.3%(58/134)和41.7%(55/132),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.071,P0.05);20~29歲、30~39歲、40~50歲組陽性率分別為31.8%(27/85)、48.3(42/87)和46.8%(44/94),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.911,P0.05)。結(jié)論成功表達(dá)了可溶性Pj rMsg抗原,Pj rMsg-ELISA檢測結(jié)果表明北京地區(qū)成人耶氏肺孢子菌感染率較高。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院 北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 耶氏肺孢子菌 主要表面糖蛋白 重組抗原 抗體
【基金】：北京熱帶病防治研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(No.2013RDBF03)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)是一種引起肺部機(jī)會(huì)性感染的真菌類病原體,引起免疫缺陷患者肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)。PCP高危人群包括艾滋病患者,器官移植患者,接受免疫抑制劑治療者以及營養(yǎng)不良的嬰兒。研究表明Pj通過主要表面糖蛋白(major surf

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