本文關鍵詞：抗幽門螺桿菌尿素酶B亞單位單克隆抗體制備和鑒定及其應用

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【摘要】：目的制備抗幽門螺桿菌(Hp)的單克隆抗體(mAb),并對該Hp mAb進行分析鑒定,建立一種檢測患者由于Hp感染而在血清中產(chǎn)生Hp抗體的競爭ELISA檢測方法。方法用滅活的Hp免疫BALB/c小鼠,通過雜交瘤技術制備Hp mAb。我們采用Hp混合蛋白包括毒素相關蛋白A(CagA)、空泡毒素A(VacA)和尿素酶以及滅活的Hp菌體篩選陽性雜交瘤細胞株,用ELISA和Western blot等技術對所獲得的Hp mAb進行鑒定。利用辣根過氧化物酶(HRP)標記所篩選的Hp mAb來建立一個可檢測患者血清中Hp抗體的競爭ELISA。結果通過大規(guī)模的雜交瘤篩選,我們選擇了1株將其命名為C3 Hp mAb,其抗體亞型為IgG2a,腹水效價可達1×107。Western blot法、ELISA和質譜檢測結果顯示,該C3 Hp mAb能特異地識別Hp的尿素酶B亞單位。用這個C3 Hp mAb,我們建立了一種可檢測患者血清中Hp抗體的競爭ELISA。結論成功獲得一種可以特異識別Hp尿素酶B亞單位的mAb,建立了一種可檢測患者血清中Hp抗體的競爭ELISA。
【作者單位】： 廈門大學生命科學學院雜交瘤和抗體技術中心;廈門大學附屬第一醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 幽門螺桿菌 單克隆抗體 競爭ELISA
【基金】：福建省科技重點項目(2011Y0050) 廈門市科技計劃項目(3502Z20123009) 國家基礎科學人才培養(yǎng)基金(J1310027)
【分類號】：R378
【正文快照】： 1982年Warren和Mashall首次發(fā)現(xiàn)一種革蘭氏陰性微需氧細菌,稱為幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)[1]。目前,Hp感染被公認為是慢性胃炎,胃潰瘍的重要病因,50%以上人群的上游消化道都寄居著幽門螺桿菌[2]。目前檢測Hp的常用方法采用細菌分離培養(yǎng)、組織染色、快速尿素酶試驗等

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本文編號：709850