人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴增人臍帶間充質(zhì)干細胞
本文關鍵詞:人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴增人臍帶間充質(zhì)干細胞
更多相關文章: 干細胞 臍帶臍血干細胞 培養(yǎng) 間充質(zhì)干細胞 血小板裂解液 細胞培養(yǎng) 成骨分化 成脂分化
【摘要】:背景:目前國內(nèi)外大多數(shù)實驗仍采用經(jīng)典的培養(yǎng)基和胎牛血清進行臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng),血清培養(yǎng)潛在的不安全因素限制了未來臨床應用的可行性。目的:以人血小板裂解液替代胎牛血清培養(yǎng)、鑒定人間充質(zhì)干細胞,以期進一步應用于臨床低密度擴增人間充質(zhì)干細胞。方法:人血小板裂解液通過反復凍融、離心、過濾、濃縮等方法制備。以IMDM為基礎培養(yǎng)基,添加5%濃縮血小板裂解液作為實驗組培養(yǎng)基;以添加體積分數(shù)10%胎牛血清為對照組培養(yǎng)基。采用酶消化法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細胞,以3 000/cm2的濃度進行傳代培養(yǎng),待細胞擴增至P5代后,進行細胞形態(tài)與直徑、免疫表型、成骨成脂分化、克隆形成率等細胞生物學特性檢測,并比較兩者之間的差別。結果與結論:人血小板裂解液擴增的臍帶間充質(zhì)干細胞形態(tài)細長,有更高的細胞累積群倍數(shù);克隆形成檢測結果顯示兩者形成的克隆效率差異無顯著性意義,流式細胞術檢測結果顯示兩者有相似的細胞表型,體外誘導分化顯示兩者都具有成骨、成脂分化能力,但人血小板裂解液擴增的間充質(zhì)干細胞成骨分化能力更強。提示人血小板裂解液可以取代胎牛血清用于臨床低密度擴增人間充質(zhì)干細胞。
【作者單位】: 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學組織胚胎學教研室;北京京蒙高科干細胞技術有限公司;
【關鍵詞】: 干細胞 臍帶臍血干細胞 培養(yǎng) 間充質(zhì)干細胞 血小板裂解液 細胞培養(yǎng) 成骨分化 成脂分化
【基金】:內(nèi)蒙古自治區(qū)干細胞科技創(chuàng)新團隊資助項目(kjt0020947)~~
【分類號】:R329
【正文快照】: 文章亮點:文章創(chuàng)新性地應用人血小板裂解液低密度大規(guī)模擴增臍帶間充干細胞,對比分析擴增后臍帶間充干細胞的生物學特性,擬在體外建立一套簡便規(guī)范、行之有效的臍帶間充質(zhì)干細胞分離、純化、培養(yǎng)、擴增及鑒定體系。結果顯示人血小板裂解液培養(yǎng)基可以滿足臍帶間充質(zhì)干細胞體外
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