本文關(guān)鍵詞：人熱休克蛋白72轉(zhuǎn)染人脂肪間充質(zhì)干細胞的研究

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【摘要】：目的觀察人熱休克蛋白72(HSP72)基因體外轉(zhuǎn)染人脂肪間充質(zhì)干細胞(ASCs)及其HSP72表達情況。方法通過腹部取皮術(shù)獲得的皮下脂肪利用膠原酶消化法進行體外分離培養(yǎng),體外擴增至第3代,用腺病毒載體系統(tǒng)將人源性HSP72轉(zhuǎn)染至第3代ASCs,在倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染后的細胞形態(tài)和生長變化,應用實時熒光定量PCR、Western blot法鑒定HSP72在ASCs中的表達。結(jié)果皮下脂肪經(jīng)消化,體外培養(yǎng)可獲得ASCs P3代;ASCs轉(zhuǎn)染24 h后,綠色熒光蛋白表達明顯增強。經(jīng)實時熒光定量PCR證實轉(zhuǎn)基因ASCs表達HSP72m RNA在24 h后逐漸增強。Western blot檢測證實轉(zhuǎn)基因ASCs在24 h后出現(xiàn)特征條帶,而空白組未出現(xiàn)條帶。結(jié)論采用腺病毒介導的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)可將HSP72基因轉(zhuǎn)染至ASCs中,并可以在HSP72m RNA和蛋白中有效表達,ASCs可以作為HSP72基因治療的載體。
【作者單位】： 湖南師范大學第一附屬醫(yī)院皮膚科;第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院全軍整形外科研究所;湖南師范大學第一附屬醫(yī)院整形美容科;湖南師范大學第一附屬醫(yī)院病理科;
【關(guān)鍵詞】： 熱休克蛋白 脂肪干細胞 轉(zhuǎn)染
【基金】：長沙市科技局基金(No:K1303034-31) 湖南省發(fā)展改革委員會一般項目(No:2013-1199-3) 湖南省研究生創(chuàng)新項目(No:CX2013B235)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 2001年ZUK等[1]從抽吸脂肪中發(fā)現(xiàn)脂肪干細胞(adipose derived stem/stromal cells,ASCs),此后關(guān)于ASCs的研究迅速增多;ASCs具有多能分化潛力,已有許多研究證明其能分化成脂肪細胞[2]、骨細胞[3]、軟骨細胞[4]、心肌細胞[5]和神經(jīng)細胞[6]等。目前ASCs是很有前景的干細胞;熱休克

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬麗;文輝才;眭云鵬;簡雪平;;細胞輔助脂肪移植在顏面軟組織凹陷畸形中的臨床應用進展[J];廣東醫(yī)學;2014年13期

2 Qiaozhi Wang;Lile Zhou;Yong Guo;Guangyi Liu;Jiyan Cheng;Hong Yu;;Differentiation of human adipose-derived stem cells into neuron-like cells by Radix Angelicae Sinensis[J];Neural Regeneration Research;2013年35期

3 姜麗麗;劉天慶;宋克東;關(guān)水;李香琴;葛丹;;1-磷酸鞘氨醇促進間充質(zhì)干細胞向心肌分化[J];生物工程學報;2013年11期

4 井樂剛;喬靜;路芳;甄鑫;盧Z，

本文編號：699798