發(fā)布時(shí)間：2017-08-13 12:25

  本文關(guān)鍵詞：CAT為報(bào)告基因的銅綠假單胞菌啟動(dòng)子文庫(kù)的建立及初步鑒定

  更多相關(guān)文章： 氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT) 報(bào)告基因 銅綠假單胞菌(PA) 啟動(dòng)子文庫(kù)

【摘要】：以CAT(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)為報(bào)告基因,構(gòu)建p CAT2啟動(dòng)子探針載體從綠膿桿菌基因文庫(kù)中篩選啟動(dòng)子。Sau3AⅠ酶切銅綠假單胞菌的基因組,回收(500~1 500 bp)片段并與p CAT2載體連接構(gòu)建銅綠假單胞菌的基因組文庫(kù),PCR鑒定文庫(kù)的多樣性,利用氯霉素(10μg/m L)和卡那霉素(50μg/m L)雙抗平板篩選了16株陽(yáng)性菌株,并用PCR、測(cè)序、NCBI比對(duì)進(jìn)行鑒定。構(gòu)建的基因文庫(kù)的庫(kù)容量可達(dá)50 000個(gè),覆蓋基因全長(zhǎng)的3.5倍,插入率達(dá)90%,具有較強(qiáng)的隨機(jī)性。采用雙抗平板進(jìn)行啟動(dòng)子的篩選,篩選效率高達(dá)96%。獲得了綠膿桿菌基因組中的9個(gè)啟動(dòng)子,同源性達(dá)99%以上,并對(duì)其活性進(jìn)行初步鑒定,為銅綠假單胞菌基因表達(dá)調(diào)控的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;
【關(guān)鍵詞】： 氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT) 報(bào)告基因 銅綠假單胞菌(PA) 啟動(dòng)子文庫(kù)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31160193) 云南省教育廳科學(xué)研究基金項(xiàng)目(2010Y398) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究面上項(xiàng)目(2010ZC055;2012FB135)
【分類號(hào)】：R3416;R378.991
【正文快照】： 氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(Chloramphenicol acetyl-transferase,CAT)是一種原核酶類,含有CAT的細(xì)菌暴露在氯霉素中可以使其乙�；セ钚�,這是某些細(xì)菌抗氯霉素的主要原因,該酶能在大腸桿菌中表達(dá),且非常穩(wěn)定[1],是常用的報(bào)告基因之一。銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)又

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 袁文常;金黃色葡萄球菌適應(yīng)性耐藥及MRSA耐藥調(diào)控機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王曉玲,鄭云雁;用肽核酸快速檢驗(yàn)、鑒定和計(jì)數(shù)瓶裝水中的銅綠假單胞菌[J];中國(guó)食品衛(wèi)生雜志;2001年01期

2 周轉(zhuǎn);90株銅綠假單胞菌血清型及生化反應(yīng)[J];河南醫(yī)藥信息;2002年23期

3 劉蓉,謝芬,周黎明,楊云霞,朱玲,王浴生;對(duì)碳青霉烯類耐藥的銅綠假單胞菌的金屬β-內(nèi)酰胺酶研究[J];四川生理科學(xué)雜志;2004年04期

4 楊�；�,沈薇,應(yīng)春妹,葉楊芹,于嘉屏;神經(jīng)外科病房銅綠假單胞菌流行株分析[J];中國(guó)抗感染化療雜志;2004年06期

5 陳海金,張瑞琴;銅綠假單胞菌醫(yī)院感染及其耐藥性的分析[J];中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析;2005年03期

6 李國(guó)豪 ,徐邦牢 ,李萍 ,雷秀霞;銅綠假單胞菌耐環(huán)丙沙星動(dòng)態(tài)變化[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2005年03期

7 楊鳳琴,楊鳳蓮;87株銅綠假單胞菌的分布及藥敏結(jié)果分析[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2005年08期

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 鄧麗華;許美榮;胡麗萍;;銅綠假單胞菌的耐藥性及β-內(nèi)酰胺酶基因的研究[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 付建榮;劉群;張艷紅;劉金偉;劉靜;李建;;銅綠假單胞菌燒傷患者分離株β-內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類耐藥基因研究[A];第四屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

4 陳一強(qiáng);陳海榮;;生物膜形成相關(guān)的銅綠假單胞菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11屆全國(guó)內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

5 曾燕麗;蘭小鵬;江麗;劉豐偉;;滅活銅綠假單胞菌DNA適體的篩選和鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

6 李超;黃亮;劉慶中;王賽芳;鄭佳音;周鐵麗;;銅綠假單胞菌產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶和外膜蛋白缺失的檢測(cè)[A];2008年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 李小燕;卓超;馮景宇;;低濃度乙醇誘導(dǎo)銅綠假單胞菌毒力基因的表達(dá)量變化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

8 李俊娟;蔣捍東;;亞抑菌濃度抗生素對(duì)銅綠假單胞菌生物膜形成的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

9 李曉玲;高華;劉正祥;;銅綠假單胞菌耐藥性5年連續(xù)監(jiān)測(cè)[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

10 羅燕萍;沈定霞;裴保香;徐雅萍;白立彥;;銅綠假單胞菌耐藥性與五種抗假單胞菌抗生素使用量相關(guān)性分析[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 俞云松;銅綠假單胞菌耐藥全國(guó)流行[N];健康報(bào);2008年

2 李曙平;銅綠假單胞菌 老年病房的主要致病菌[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

3 王振嶺;銅綠假單胞菌耐藥問(wèn)題嚴(yán)重[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

4 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院檢驗(yàn)科 胡志東;關(guān)注銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥[N];健康報(bào);2009年

5 ;碳青霉烯類抗生素[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張若文;燒傷病房耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制及分子流行病學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2012年

2 張亞妮;谷胱甘肽與銅綠假單胞菌致病性及抗生素抗性的關(guān)系研究[D];西北大學(xué);2009年

3 陳林;銅綠假單胞菌內(nèi)在耐藥性相關(guān)基因的篩選及研究[D];西北大學(xué);2010年

4 李學(xué)如;銅綠假單胞菌耐喹諾酮類藥物的分子機(jī)制研究[D];四川大學(xué);2003年

5 徐洋洋;銅綠假單胞菌致病性受信號(hào)分子調(diào)控及其機(jī)理研究[D];西北大學(xué);2013年

6 魏殿軍;臨床分離菌株耐藥性分析及銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制的探討[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

7 郭俏;銅綠假單胞菌致病因子抑制劑及喹諾酮信號(hào)分子介導(dǎo)的調(diào)節(jié)途徑研究[D];西北大學(xué);2013年

8 孫小敏;氨溴索對(duì)銅綠假單胞菌生物被膜密度感應(yīng)系統(tǒng)的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

9 路新枝;群體感應(yīng)和環(huán)二鳥(niǎo)苷酸對(duì)銅綠假單胞菌致病因子的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2009年

10 衣美英;外科監(jiān)護(hù)室銅綠假單胞菌多重耐藥機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫震;銅綠假單胞菌的耐藥性及耐亞胺培南機(jī)制的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

2 謝才文;銅綠假單胞菌多藥耐藥性分子流行病學(xué)研究[D];廣東藥學(xué)院;2010年

3 盧錦萍;兒童銅綠假單胞菌感染臨床特點(diǎn)及高危因素分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

4 張?jiān)伱?落葉松皮素對(duì)銅綠假單胞菌生物膜作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2004年

5 劉豐偉;體外篩選銅綠假單胞菌適體的研究及初步應(yīng)用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2007年

6 江守偉;2008-2009年安徽省銅綠假單胞菌耐藥性監(jiān)測(cè)[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

7 馮軍花;銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性及部分耐藥機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

8 李靚;山西太原地區(qū)銅綠假單胞菌的調(diào)查分析及產(chǎn)金屬酶基因型研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王卉;銅綠假單胞菌臨床株產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶及其耐藥性的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

10 顧曉花;紅霉素對(duì)銅綠假單胞菌毒力的抑制[D];上海交通大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：667281