本文關(guān)鍵詞：表達(dá)HBx的肝前體細(xì)胞的小鼠肝內(nèi)移植模型的構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： 乙型肝炎病毒X蛋白 肝前體細(xì)胞 綠色熒光蛋白 門(mén)靜脈 小鼠模型

【摘要】：目的構(gòu)建表達(dá)乙肝病毒X基因(HBx)的肝前體細(xì)胞,并經(jīng)小鼠門(mén)靜脈注射建立肝內(nèi)移植模型,為進(jìn)一步研究HBx對(duì)肝前體細(xì)胞的作用和影響及其在原發(fā)性肝癌發(fā)病機(jī)制中的作用奠定了基礎(chǔ)。方法分別將表達(dá)HBx基因的重組腺病毒Ad-HBx-GFP和空載體Ad-GFP轉(zhuǎn)染小鼠肝前體細(xì)胞,再經(jīng)小鼠門(mén)靜脈注射后3、7、14 d取血清和肝組織,檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)變化情況,觀察綠色熒光蛋白表達(dá)情況,免疫組織化學(xué)法觀察HBx陽(yáng)性染色,并取表達(dá)高峰在第7天的肝組織,進(jìn)行Western blot法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)法分別檢測(cè)HBx的蛋白及mRNA表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建了表達(dá)HBx并靶向針對(duì)肝前體細(xì)胞的小鼠模型,綠色熒光蛋白表達(dá)量、免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量及血清ALT均在注射后第7天達(dá)到高峰,RT-PCR及Western blot均檢測(cè)到第7天14-19/Ad-HBx-GFP組小鼠肝組織目的基因及蛋白的特異性表達(dá),與14-19/Ad-GFP組及生理鹽水注射組相比結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論成功構(gòu)建了表達(dá)HBx并靶向針對(duì)肝前體細(xì)胞的小鼠模型,操作可靠,重復(fù)性好,效果穩(wěn)定,不僅對(duì)探討原發(fā)性肝癌的發(fā)生機(jī)制奠定了基礎(chǔ),也為腫瘤動(dòng)物模型的構(gòu)建提供了新的思路。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒X蛋白 肝前體細(xì)胞 綠色熒光蛋白 門(mén)靜脈 小鼠模型
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81071770,81201679)~~
【分類號(hào)】：R-332;R735.7
【正文快照】： 與腫瘤研究中心1,基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物研究中心2,基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室3)原發(fā)性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范圍內(nèi)重大惡性疾病之一,而乙型肝炎病毒(Hepa-titis B virus,HBV)是其發(fā)病的首要因素[1]。由HBV編碼的乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B v

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【相似文獻(xiàn)】

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6 謝尚U，

本文編號(hào)：651582