發(fā)布時間：2017-08-09 14:17

  本文關鍵詞：綠原酸人工抗原的合成及多克隆抗體的制備

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【摘要】：目的合成綠原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制備CHA多克隆抗體,為制備過敏成分分析的免疫芯片奠定基礎。方法采用碳二亞胺法分別合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鑒定人工抗原偶聯(lián)是否成功;間接ELISA方法檢測免疫小鼠血清中抗體效價;間接競爭ELISA方法檢測抗體特異性。結果經(jīng)UV法和TLC法檢測,CHA與BSA偶聯(lián)成功。血清抗體效價為1∶128 000,CHA-PAbs的質(zhì)量濃度與抑制率的線性方程為Y=-0.10 lnX+1.158,線性檢測范圍為15.6~250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黃芩苷等與其常配伍應用的中藥化合物均無交叉反應。結論成功制備了靈敏度高、特應性好的CHA多克隆抗體,為CHA的微量檢測和過敏性研究提供了實驗依據(jù)。
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院;北京中醫(yī)藥大學"經(jīng)典方劑的應用基礎研究"創(chuàng)新團隊;北京中醫(yī)藥大學科研實驗中心;
【關鍵詞】： 綠原酸 人工抗原 多克隆抗體 碳二亞胺法 免疫分析
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81274043,81373542) “重大新藥創(chuàng)制”國家專項課題(2010ZX09502-002)
【分類號】：R392
【正文快照】： 綠原酸(chlorogenic acid,CHA)具有抗氧化、抗炎、抗菌等多方面的藥理作用[1-2],是清開靈、熱毒寧、雙黃連、魚腥草、茵梔黃等中藥注射劑中的主要有效成分之一。但近年來,有學者認為CHA可能是引起上述中藥注射劑不良反應的主要原因[3]。動物實驗也證明,CHA可以作為一種半抗原

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本文編號：645707