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  本文關(guān)鍵詞：綠原酸人工抗原的合成及多克隆抗體的制備

  更多相關(guān)文章： 綠原酸 人工抗原 多克隆抗體 碳二亞胺法 免疫分析

【摘要】：目的合成綠原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制備CHA多克隆抗體,為制備過(guò)敏成分分析的免疫芯片奠定基礎(chǔ)。方法采用碳二亞胺法分別合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鑒定人工抗原偶聯(lián)是否成功;間接ELISA方法檢測(cè)免疫小鼠血清中抗體效價(jià);間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)抗體特異性。結(jié)果經(jīng)UV法和TLC法檢測(cè),CHA與BSA偶聯(lián)成功。血清抗體效價(jià)為1∶128 000,CHA-PAbs的質(zhì)量濃度與抑制率的線性方程為Y=-0.10 lnX+1.158,線性檢測(cè)范圍為15.6~250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黃芩苷等與其常配伍應(yīng)用的中藥化合物均無(wú)交叉反應(yīng)。結(jié)論成功制備了靈敏度高、特應(yīng)性好的CHA多克隆抗體,為CHA的微量檢測(cè)和過(guò)敏性研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;北京中醫(yī)藥大學(xué)"經(jīng)典方劑的應(yīng)用基礎(chǔ)研究"創(chuàng)新團(tuán)隊(duì);北京中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心;
【關(guān)鍵詞】： 綠原酸 人工抗原 多克隆抗體 碳二亞胺法 免疫分析
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81274043,81373542) “重大新藥創(chuàng)制”國(guó)家專項(xiàng)課題(2010ZX09502-002)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 綠原酸(chlorogenic acid,CHA)具有抗氧化、抗炎、抗菌等多方面的藥理作用[1-2],是清開靈、熱毒寧、雙黃連、魚腥草、茵梔黃等中藥注射劑中的主要有效成分之一。但近年來(lái),有學(xué)者認(rèn)為CHA可能是引起上述中藥注射劑不良反應(yīng)的主要原因[3]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證明,CHA可以作為一種半抗原

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3 高t熻，

本文編號(hào)：645707