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氧氣葡萄糖剝奪誘導(dǎo)原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放谷氨酸

發(fā)布時(shí)間:2017-08-08 19:07

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【摘要】:目的觀察氧氣葡萄糖剝奪(OGD)對(duì)原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸釋放的影響,并探討其釋放機(jī)制。方法原代培養(yǎng)SD大鼠海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞,將其分為OGD組和對(duì)照組。OGD組的細(xì)胞置于不含糖和氧的培養(yǎng)基,37℃,950 mL/L N2和50 mL/L CO2,飽和濕度的培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng),而對(duì)照組細(xì)胞則正常培養(yǎng)。缺糖缺氧刺激時(shí)長分別為0、15、30、60、90、120 min,采用高效液相色譜,測定細(xì)胞外液的谷氨酸濃度。分別選用連接子蛋白43(Cx43)特異性反義寡核苷酸(Cx43-ASODN)和Cx43半通道的阻斷劑Gap26預(yù)處理星形膠質(zhì)細(xì)胞,采用高效液相色譜,測定細(xì)胞外液谷氨酸濃度,觀察OGD對(duì)其谷氨酸釋放的影響。結(jié)果與對(duì)照組相比較,OGD刺激后,細(xì)胞外液谷氨酸濃度升高,并在刺激90 min后,達(dá)到峰值,為(5.00±0.30)nmol/mL,顯著高于對(duì)照組的(2.36±0.15)nmol/mL(P0.05);而OGD條件下,Cx43-ASODN或Cx43半通道阻斷劑均可抑制細(xì)胞外液谷氨酸濃度的升高,刺激90 min后,細(xì)胞外液谷氨酸濃度分別為(4.02±0.18)nmol/mL和(3.93±0.32)nmol/mL,顯著低于單純OGD刺激組(P0.05)。結(jié)論 OGD可以誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞通過Cx43半通道釋放谷氨酸。
【作者單位】: 解放軍第118醫(yī)院;解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部病理學(xué)與病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】氧氣葡萄糖剝奪 星形膠質(zhì)細(xì)胞 谷氨酸 連接子蛋白
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81071595,81201514)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 對(duì)腦梗死損傷機(jī)制的研究大多集中在缺血缺氧對(duì)神經(jīng)元的影響,大量研究表明,缺血缺氧損傷可誘導(dǎo)神經(jīng)元大量釋放谷氨酸,導(dǎo)致谷氨酸在細(xì)胞外液大量蓄積,引起谷氨酸的毒性作用,被認(rèn)為是腦梗死損傷的主要機(jī)制[1-2]。而近年的研究表明,星形膠質(zhì)細(xì)胞也能夠釋放谷氨酸,參與神經(jīng)系統(tǒng)的谷

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