高表達(dá)FGFR4細(xì)胞株的建立及其生物活性分析
本文關(guān)鍵詞:高表達(dá)FGFR4細(xì)胞株的建立及其生物活性分析
更多相關(guān)文章: 成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR) HEK 高表達(dá) 細(xì)胞增殖
【摘要】:目的構(gòu)建FGFR4高表達(dá)細(xì)胞,研究FGFR4對細(xì)胞增殖能力的影響及相關(guān)蛋白活化機制,為研究以FGFR4為靶點的藥物提供細(xì)胞模型。方法構(gòu)建FGFR4真核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,篩選穩(wěn)定表達(dá)FGFR4細(xì)胞株,免疫印跡和免疫熒光分析FGFR4表達(dá)水平,細(xì)胞計數(shù)檢測FGFR4高表達(dá)細(xì)胞的增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測FGFR4對細(xì)胞周期的影響,同時對ERK1/2磷酸化水平進(jìn)行免疫印跡分析。結(jié)果在相同培養(yǎng)環(huán)境下,HEK293-FGFR4細(xì)胞同HEK293-pcDNA細(xì)胞相比,其增殖能力提高。周期分析表明,FGFR4使G0/G1期降低,促進(jìn)細(xì)胞的增殖。同時,對MAPK信號通路進(jìn)行了初步分析,發(fā)現(xiàn)FGFR4蛋白可以引起ERK1/2的磷酸化,從而導(dǎo)致MAPK/ERK1/2通路的激活,說明FGFR4可激活MAPK信號通路。結(jié)論成功構(gòu)建了FGFR4高表達(dá)細(xì)胞株,為篩選以FGFR4為靶標(biāo)的抗腫瘤藥物奠定了前期實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥物研究所;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】: 成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR) HEK 高表達(dá) 細(xì)胞增殖
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81202495,81101725) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金(No.xjj2011092)~~
【分類號】:R346
【正文快照】: 成纖維細(xì)胞生長因子受體4(fibroblast growthfactor receptor 4,FGFR4)屬于FGFR家族成之一,其結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域、疏水跨膜區(qū)和細(xì)胞質(zhì)含有酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。FGFR4有廣泛的生物學(xué)功能,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、存活、遷移和分化的能力[1-7],FGFR4信號通路的激活在腫瘤
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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8 丁v,
本文編號:616614
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