本文關鍵詞：結核分枝桿菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因重組穿梭表達質粒的構建及鑒定

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【摘要】：目的構建結核桿菌泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)中Pup、Dop、PafA和Mpa基因的重組大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達質粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,并對其進行鑒定。方法提取結核桿菌國際標準強毒株H37Rv基因組DNA,以此為模板PCR擴增Pup、Dop、PafA和Mpa基因編碼序列并測序。擴增產物克隆至大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達質粒pMV361,并轉化E.coli DH5α感受態(tài)細胞,利用PCR技術、雙酶切技術及基因測序技術對構建的重組穿梭表達質粒進行鑒定。結果 PCR擴增的Pup、Dop、PafA和Mpa基因片段分別為213、1 683、1 377、和1 848bp,與預期長度一致;雙酶切鑒定Pup、Dop、PafA和Mpa基因均成功插入穿梭表達質粒pMV361,測序顯示插入穿梭表達質粒pMV361的Pup、Dop、PafA和Mpa基因序列與GenBank公布的序列一致。結論成功構建了重組大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達質粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,為進一步研究結核分枝桿菌泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)奠定了基礎。
【作者單位】： 石河子大學醫(yī)學院病理生理學教研室 石河子大學"新疆地方與民族高發(fā)病"教育部重點實驗室;石河子市人民醫(yī)院老年病一科;
【關鍵詞】： 結核分枝桿菌 泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng) pMV 重組穿梭表達質粒
【基金】：國家自然科學基金項目(No.81260261,81160192,81260241,81160001) 新疆生產建設兵團醫(yī)藥專項資金項目(No.2012BA022)
【分類號】：R378
【正文快照】： 結核病是一種由結核分枝桿菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)感染引起的呼吸道傳染性疾病。據(jù)統(tǒng)計[1],全球每年約有150萬人因患結核病而死亡,并且近幾年結核病患病人數(shù)急劇攀升,每年約有900***萬新增病例,故結核病又被稱為“災難性疾病”。MTB中的泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)(pr

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張玲霞;王永怡;陳玉琪;王姝;李軍;;2012年傳染病熱點回顧[J];傳染病信息;2013年01期

2 汪春軍;林進;張俊杰;;原核生物類泛素蛋白Pup-蛋白酶體系統(tǒng)的研究進展[J];生物化學與生物物理進展;2011年12期

3 梁晨;姜曉霞;張鋒;王霞;吳芳;章樂;吳江東;張春軍;張輝;樊超;莊睿;李文娟;張萬江;;結核分枝桿菌PhoP/PhoR基因重組穿梭表達質粒的構建及鑒定[J];石河子大學學報(自然科學版);2013年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉毅;田苗;李傳友;;結核分枝桿菌中Pup-蛋白酶體系統(tǒng)和致病性之間的關系[J];北京醫(yī)學;2012年12期

2 張軍;吳婷;夏寧邵;;戊型肝炎診斷、預防及治療新進展[J];傳染病信息;2013年02期

3 王永怡;王姝;盧福昱;胡玫;董時軍;陳玉琪;李楠;郭子靜;張海陵;李軍;;2013年感染性疾病熱點回顧[J];傳染病信息;2014年01期

4 蔣旺林;;肝硬化合并潰瘍出血108例臨床分析[J];華夏醫(yī)學;2014年01期

5 胡越凱;盧洪洲;;耐藥結核病的藥物選擇[J];傳染病信息;2014年03期

6 張云輝;王姝;陳玉琪;李軍;;埃博拉出血熱研究現(xiàn)狀及2014年疫情進展[J];傳染病信息;2014年04期

7 張艷菊;李雪;富裕;;感染科護士常見職業(yè)危害及防護[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2014年06期

8 潘春燕;黃呈輝;謝春英;程明剛;袁利;;散發(fā)性戊型病毒性肝炎71例臨床研究[J];中國熱帶醫(yī)學;2014年02期

9 劉威;閔莉;張秋芬;;病毒性肝炎相關職業(yè)人群戊型肝炎疫苗認知度及接種意愿調查[J];中國生物制品學雜志;2014年04期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 毛金校;結核分枝桿菌蛋白酶體輔助因子PafC在氟喹諾酮類藥物莫西沙星耐受中的作用[D];西南大學;2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 ;腸道病毒(EV71)感染診療指南(2008年版)[J];傳染病信息;2008年03期

2 張玲霞;王永怡;陳文;李軍;王姝;;盤點2010年傳染病熱點[J];傳染病信息;2011年01期

3 張玲霞;王永怡;王姝;李軍;孟立珊;徐漠研;;聚焦當今傳染病[J];傳染病信息;2012年01期

4 李文剛;徐哲;趙敏;;人獸共患病的特征、誤診原因及其對策[J];傳染病信息;2012年01期

5 董江濤;徐芳;田璽擇;姚楠;吳芳;章樂;王遠志;曹旭東;張萬江;;結核分枝桿菌感染小鼠肺泡巨噬細胞誘導結核分枝桿菌小分子熱休克蛋白HSP16.3分泌表達模型的建立及鑒定[J];石河子大學學報(自然科學版);2012年02期

6 李躍峰;付強;張俊波;史慧君;李志強;程婷婷;張輝;曹旭東;陳創(chuàng)夫;;結核分枝桿菌ESAT6基因真核表達載體的構建及表達[J];石河子大學學報(自然科學版);2013年03期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 單志新,余細勇,林秋雄,符永恒,譚虹虹,林曙光;細菌-酵母穿梭表達質粒pGBKT7-MIF的構建及轉化[J];中山醫(yī)科大學學報;2002年05期

2 趙寶華,楊虹,許崇波,石振華;大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達質粒pY-α的構建[J];河北師范大學學報;2002年02期

3 汪謀岳;大腸桿菌-分支桿菌穿梭表達質粒的構建及外源基因人白細胞介素-2在大腸桿菌和卡介苗中的表達[J];中華醫(yī)學信息導報;1998年01期

4 程繼忠,鄭波,海濤,皇甫永穆;大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達質粒pBCG-2100的構建及應用[J];生物工程學報;1999年02期

5 陳全,朱道銀,駱旭東,蔣英,江山;用結核分枝桿菌HSP70啟動子構建分枝桿菌穿梭表達質粒的研究[J];重慶醫(yī)科大學學報;2003年06期

6 呂琳;曹紅丹;王丕龍;劉少寧;王麗娟;向廷秀;;分枝桿菌穿梭表達質粒pJHSP70的構建及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年10期

7 劉鵬,張清秀,朱振宇,庾蕾,馬澗泉;細菌-酵母穿梭表達質粒pGBKT7-LMP1的構建與鑒定[J];中山醫(yī)科大學學報;2001年05期

8 曾星,楊明,祁學忠,王光蕙;大腸桿菌-分支桿菌穿梭表達質粒的構建及外源基因人白細胞介素-2在大腸桿菌和卡介苗中的表達[J];中華結核和呼吸雜志;1997年06期

9 張大軍，，皇甫永穆，錢明，梁駒卿，李東;分枝桿菌穿梭表達質粒的構建及外源基因在分枝桿菌中的穩(wěn)定表達[J];同濟醫(yī)科大學學報;1995年04期

10 李杜漸;徐耀庭;韋芳;李惠民;黃汝強;許曉文;顧煒;顧偉平;;卡介苗穿梭表達質粒pMS MCP-1的構建與鑒定[J];醫(yī)學理論與實踐;2012年20期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 戴五星;陳智浩;高紅;黃海浪;梁靚;皇甫永穆;;分泌型原核穿梭表達質粒pBCG-SP-HSP65的構建及其表達[A];湖北省暨武漢市生物化學與分子生物學學會第七屆第十四次學術年會論文摘要集[C];2003年

本文編號：599629