本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因重組穿梭表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定

  更多相關(guān)文章： 結(jié)核分枝桿菌 泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng) pMV 重組穿梭表達(dá)質(zhì)粒

【摘要】：目的構(gòu)建結(jié)核桿菌泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)中Pup、Dop、PafA和Mpa基因的重組大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。方法提取結(jié)核桿菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株H37Rv基因組DNA,以此為模板PCR擴(kuò)增Pup、Dop、PafA和Mpa基因編碼序列并測(cè)序。擴(kuò)增產(chǎn)物克隆至大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV361,并轉(zhuǎn)化E.coli DH5α感受態(tài)細(xì)胞,利用PCR技術(shù)、雙酶切技術(shù)及基因測(cè)序技術(shù)對(duì)構(gòu)建的重組穿梭表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行鑒定。結(jié)果 PCR擴(kuò)增的Pup、Dop、PafA和Mpa基因片段分別為213、1 683、1 377、和1 848bp,與預(yù)期長(zhǎng)度一致;雙酶切鑒定Pup、Dop、PafA和Mpa基因均成功插入穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV361,測(cè)序顯示插入穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV361的Pup、Dop、PafA和Mpa基因序列與GenBank公布的序列一致。結(jié)論成功構(gòu)建了重組大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,為進(jìn)一步研究結(jié)核分枝桿菌泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室 石河子大學(xué)"新疆地方與民族高發(fā)病"教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;石河子市人民醫(yī)院老年病一科;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng) pMV 重組穿梭表達(dá)質(zhì)粒
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81260261,81160192,81260241,81160001) 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)藥專項(xiàng)資金項(xiàng)目(No.2012BA022)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病是一種由結(jié)核分枝桿菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)感染引起的呼吸道傳染性疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)[1],全球每年約有150萬人因患結(jié)核病而死亡,并且近幾年結(jié)核病患病人數(shù)急劇攀升,每年約有900***萬新增病例,故結(jié)核病又被稱為“災(zāi)難性疾病”。MTB中的泛素樣蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)(pr

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張玲霞;王永怡;陳玉琪;王姝;李軍;;2012年傳染病熱點(diǎn)回顧[J];傳染病信息;2013年01期

2 汪春軍;林進(jìn);張俊杰;;原核生物類泛素蛋白Pup-蛋白酶體系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2011年12期

3 梁晨;姜曉霞;張鋒;王霞;吳芳;章樂;吳江東;張春軍;張輝;樊超;莊睿;李文娟;張萬江;;結(jié)核分枝桿菌PhoP/PhoR基因重組穿梭表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉毅;田苗;李傳友;;結(jié)核分枝桿菌中Pup-蛋白酶體系統(tǒng)和致病性之間的關(guān)系[J];北京醫(yī)學(xué);2012年12期

2 張軍;吳婷;夏寧邵;;戊型肝炎診斷、預(yù)防及治療新進(jìn)展[J];傳染病信息;2013年02期

3 王永怡;王姝;盧福昱;胡玫;董時(shí)軍;陳玉琪;李楠;郭子靜;張海陵;李軍;;2013年感染性疾病熱點(diǎn)回顧[J];傳染病信息;2014年01期

4 蔣旺林;;肝硬化合并潰瘍出血108例臨床分析[J];華夏醫(yī)學(xué);2014年01期

5 胡越凱;盧洪洲;;耐藥結(jié)核病的藥物選擇[J];傳染病信息;2014年03期

6 張?jiān)戚x;王姝;陳玉琪;李軍;;埃博拉出血熱研究現(xiàn)狀及2014年疫情進(jìn)展[J];傳染病信息;2014年04期

7 張艷菊;李雪;富裕;;感染科護(hù)士常見職業(yè)危害及防護(hù)[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2014年06期

8 潘春燕;黃呈輝;謝春英;程明剛;袁利;;散發(fā)性戊型病毒性肝炎71例臨床研究[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2014年02期

9 劉威;閔莉;張秋芬;;病毒性肝炎相關(guān)職業(yè)人群戊型肝炎疫苗認(rèn)知度及接種意愿調(diào)查[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2014年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 毛金校;結(jié)核分枝桿菌蛋白酶體輔助因子PafC在氟喹諾酮類藥物莫西沙星耐受中的作用[D];西南大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 ;腸道病毒(EV71)感染診療指南(2008年版)[J];傳染病信息;2008年03期

2 張玲霞;王永怡;陳文;李軍;王姝;;盤點(diǎn)2010年傳染病熱點(diǎn)[J];傳染病信息;2011年01期

3 張玲霞;王永怡;王姝;李軍;孟立珊;徐漠研;;聚焦當(dāng)今傳染病[J];傳染病信息;2012年01期

4 李文剛;徐哲;趙敏;;人獸共患病的特征、誤診原因及其對(duì)策[J];傳染病信息;2012年01期

5 董江濤;徐芳;田璽擇;姚楠;吳芳;章樂;王遠(yuǎn)志;曹旭東;張萬江;;結(jié)核分枝桿菌感染小鼠肺泡巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)結(jié)核分枝桿菌小分子熱休克蛋白HSP16.3分泌表達(dá)模型的建立及鑒定[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年02期

6 李躍峰;付強(qiáng);張俊波;史慧君;李志強(qiáng);程婷婷;張輝;曹旭東;陳創(chuàng)夫;;結(jié)核分枝桿菌ESAT6基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年03期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 單志新,余細(xì)勇,林秋雄,符永恒,譚虹虹,林曙光;細(xì)菌-酵母穿梭表達(dá)質(zhì)粒pGBKT7-MIF的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化[J];中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年05期

2 趙寶華,楊虹,許崇波,石振華;大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pY-α的構(gòu)建[J];河北師范大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

3 汪謀岳;大腸桿菌-分支桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及外源基因人白細(xì)胞介素-2在大腸桿菌和卡介苗中的表達(dá)[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);1998年01期

4 程繼忠,鄭波,海濤,皇甫永穆;大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pBCG-2100的構(gòu)建及應(yīng)用[J];生物工程學(xué)報(bào);1999年02期

5 陳全,朱道銀,駱旭東,蔣英,江山;用結(jié)核分枝桿菌HSP70啟動(dòng)子構(gòu)建分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒的研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2003年06期

6 呂琳;曹紅丹;王丕龍;劉少寧;王麗娟;向廷秀;;分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pJHSP70的構(gòu)建及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年10期

7 劉鵬,張清秀,朱振宇,庾蕾,馬澗泉;細(xì)菌-酵母穿梭表達(dá)質(zhì)粒pGBKT7-LMP1的構(gòu)建與鑒定[J];中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年05期

8 曾星,楊明,祁學(xué)忠,王光蕙;大腸桿菌-分支桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及外源基因人白細(xì)胞介素-2在大腸桿菌和卡介苗中的表達(dá)[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1997年06期

9 張大軍，，皇甫永穆，錢明，梁駒卿，李東;分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及外源基因在分枝桿菌中的穩(wěn)定表達(dá)[J];同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1995年04期

10 李杜漸;徐耀庭;韋芳;李惠民;黃汝強(qiáng);許曉文;顧煒;顧偉平;;卡介苗穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMS MCP-1的構(gòu)建與鑒定[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2012年20期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 戴五星;陳智浩;高紅;黃海浪;梁靚;皇甫永穆;;分泌型原核穿梭表達(dá)質(zhì)粒pBCG-SP-HSP65的構(gòu)建及其表達(dá)[A];湖北省暨武漢市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第七屆第十四次學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2003年

本文編號(hào)：599629