發(fā)布時(shí)間：2017-07-31 10:01

  本文關(guān)鍵詞：TMEM16A和TMEM16B在CCI模型鼠DRG神經(jīng)元上的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 鈣激活氯通道 TMEM16A TMEM16B NFA DRG

【摘要】：目的:比較正常大鼠、坐骨神經(jīng)壓榨性損傷(Chronic Constriction Injury,CCI)模型鼠及不同濃度尼氟滅酸(Niflumic Acid,NFA)干預(yù)后的CCI模型鼠的熱縮足反射潛伏期(Thermal Withdrawal Latency,TWL)的改變,及各組大鼠DRG神經(jīng)元上TMEM16A和TMEM16B的m RNA水平和蛋白表達(dá)的改變,旨在探討鈣激活氯通道(calcium-ctivated chloride channels,Ca CCs)在神經(jīng)病理性痛(Neuropathic pain,NPP)中的調(diào)節(jié)作用。方法:制作CCI模型;運(yùn)用熱板實(shí)驗(yàn)分別在術(shù)前1 d,術(shù)后第1、3、5、7、9、12、14d檢測(cè)正常大鼠、CCI模型鼠及10μM、50μM和300μM的NFA干預(yù)后的CCI模型鼠的TWL;運(yùn)用免疫熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)TMEM16A和TMEM16B在正常大鼠DRG上的分布;運(yùn)用RT-PCR技術(shù)和Western Blot技術(shù)分別檢測(cè)各組大鼠的DRG神經(jīng)元上,TMEM16A和TMEM16B的m RNA水平和蛋白表達(dá)。結(jié)果:(1)CCI模型鼠較正常大鼠TWL明顯縮短(P0.01,n=6),給予10μM、50μM和300μM的NFA干預(yù)后與CCI組相比TWL均明顯延長(zhǎng)(P0.01,n=6),其中50μM的NFA干預(yù)組較10μM的NFA干預(yù)組的TWL也明顯延長(zhǎng)(P0.01,n=6),但300μM的NFA干預(yù)組和50μM的NFA干預(yù)組之間的TWL無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)免疫熒光顯示在正常大鼠DRG中,TMEM16A和TMEM16B主要表達(dá)在DRG神經(jīng)元上。(3)運(yùn)用RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)CCI模型鼠較正常大鼠DRG神經(jīng)元上的TMEM16A的m RNA水平明顯上調(diào)(P0.01,n=6),CCI模型鼠給予NFA干預(yù)后DRG神經(jīng)元上的TMEM16A的m RNA水平顯著下調(diào)(P0.01,n=6),隨著NFA干預(yù)濃度的增加,TMEM16A的m RNA水平呈濃度依賴(lài)性的下調(diào)(P0.01,n=6);CCI模型鼠DRG神經(jīng)元上的TMEM16B的m RNA水平明顯下調(diào);給予NFA干預(yù)后TMEM16B的m RNA水平顯著上調(diào)(P0.01,n=6),隨著NFA干預(yù)濃度的增加,TMEM16B的m RNA水平呈濃度依賴(lài)性的上調(diào)(P0.01,n=6)。(4)運(yùn)用Western Blot技術(shù)發(fā)現(xiàn)CCI模型鼠與正常大鼠相比,DRG神經(jīng)元上的TMEM16A的表達(dá)明顯上調(diào)(P0.01,n=6),CCI模型給予NFA干預(yù)后,DRG神經(jīng)元上的TMEM16A的表達(dá)明顯下調(diào)(P0.01,n=6),隨著NFA干預(yù)濃度的增加,TMEM16A的表達(dá)呈濃度依賴(lài)性的下調(diào)(P0.01,n=6);CCI模型鼠DRG神經(jīng)元上的TMEM16B的表達(dá)明顯下調(diào);給予NFA后,TMEM16B的表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01,n=6),隨著NFA干預(yù)濃度的增加,TMEM16B的表達(dá)呈濃度依賴(lài)性的上調(diào)(P0.01,n=6)。結(jié)論:NFA干預(yù)后CCI模型鼠DRG神經(jīng)元上的TMEM16A和TMEM16B在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均發(fā)生改變,提示TMEM16A和TMEM16B可能共同參與了神經(jīng)病理性痛的產(chǎn)生。
【關(guān)鍵詞】：鈣激活氯通道 TMEM16A TMEM16B NFA DRG
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R741;R-332
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文縮略語(yǔ)表8-9
• 前言9-12
• 材料和方法12-25
• 1 材料12-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組12
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器12-14
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材14-15
• 1.4 主要實(shí)驗(yàn)液體配置15-17
• 2 方法17-25
• 2.1 CCI動(dòng)物模型制作方法17
• 2.2 NFA干預(yù)CCI模型的制備17
• 2.3 熱板實(shí)驗(yàn)及行為學(xué)觀察17-18
• 2.4 DRG神經(jīng)元制備基本方法18
• 2.5 免疫熒光染色18-19
• 2.6 蛋白提取的基本方法19-20
• 2.7 Western Blot實(shí)驗(yàn)基本步驟20-23
• 2.8 RT-PCR實(shí)驗(yàn)基本步驟23-24
• 2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法24-25
• 結(jié)果25-31
• 1 痛行為學(xué)檢測(cè)25-26
• 1.1 模型大鼠足部狀態(tài)及行為學(xué)觀測(cè)25
• 1.2 熱縮足反射潛伏期25-26
• 2 免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果26-27
• 3 RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-29
• 4 Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-31
• 討論31-34
• 結(jié)論和展望34-35
• 1 結(jié)論34
• 2 展望34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 文獻(xiàn)綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 致謝46-47
• 作者簡(jiǎn)介47-48
• 附頁(yè)48

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1 畢曉林;隋忠國(guó);張秋業(yè);;溫通巴布膏對(duì)腹瀉模型鼠的治療效果[J];齊魯醫(yī)學(xué)雜志;2008年05期

2 朱萱萱;錢(qián)先;倪文彭;吳旭彤;丁揚(yáng);蘇夢(mèng);;津血源顆粒對(duì)干燥綜合征模型鼠的干預(yù)研究[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2009年05期

3 施碧濤;武義鳴;徐慧君;馮家笙;;胚基底前腦和胚大腦皮質(zhì)植人老年癡呆模型鼠大腦皮質(zhì)的研究[J];解剖學(xué)報(bào);1990年02期

4 王炯,楊貴貞;“秘靈王”對(duì)骨髓受抑模型鼠的免疫調(diào)整作用[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;1997年06期

5 曹湘博;西月;王艷春;王宇峰;常雅萍;;維生素E對(duì)D-半乳糖亞急性中毒擬衰老模型鼠氧自由基及相關(guān)生化指標(biāo)的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2007年14期

6 李春莉,劉振祥,張丹木,劉海濤,王景龍;降糖丹對(duì)糖尿病模型鼠血糖的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)報(bào);2001年06期

7 段秀慶,宋純,許評(píng),宋春芳;去甲狀旁腺模型鼠的制備[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2005年04期

8 隋忠國(guó);畢曉林;張輝;;溫通巴布膏對(duì)腹瀉模型鼠血清前炎癥介質(zhì)水平的影響[J];中國(guó)藥物與臨床;2008年10期

9 曹湘博;韓艷非;王宇峰;常雅萍;;維生素E對(duì)D-半乳糖亞急性中毒擬衰老模型鼠自由基及相關(guān)生化指標(biāo)的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2009年14期

10 歐陽(yáng)曙光;;IL-6的臨床應(yīng)用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);1993年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 吳繼全;潘子昂;;啟神膠囊對(duì)血管性癡呆模型鼠學(xué)習(xí)、記憶的影響[A];全國(guó)中醫(yī)藥防治老年病學(xué)術(shù)交流會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2011年

2 王玉璽;王惠國(guó);王俊志;王雅賢;王麗;;祛毒膠囊對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型鼠免疫學(xué)機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[A];中醫(yī)藥學(xué)術(shù)發(fā)展大會(huì)論文集[C];2005年

3 沈勤;王佳薇;朱飛葉;;寧腸湯對(duì)腹瀉型IBS模型鼠膽囊收縮素作用的研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第二十三次全國(guó)脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2011年

4 趙琳;何苗;金萬(wàn)寶;趙海山;姚維凡;魏敏杰;;維生素E對(duì)阿爾茨海默病模型鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[A];兩岸三地藥理學(xué)與臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

5 劉克明;王春花天;李國(guó)星;何寧;張明月;;D-半乳糖模型鼠與正常老年鼠的比較研究[A];第四屆第二次中國(guó)毒理學(xué)會(huì)食品毒理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

6 萬(wàn)紅嬌;楊翠萍;方芳;葉荷平;邢娟娟;;溫膽湯對(duì)APO誘發(fā)精神分裂癥模型鼠T.C亞群、IL-2的影響[A];第五屆全國(guó)中醫(yī)藥免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)——暨環(huán)境·免疫與腫瘤防治綜合交叉會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 栗炳南;張娟;李志艷;劉珍清;譚孟群;;AAV2介導(dǎo)人apoAI與SR-BI雙基因在動(dòng)脈硬化模型鼠中的共表達(dá)[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

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1 朱啟文;寬頻噪音對(duì)AD模型鼠聽(tīng)覺(jué)記憶及中樞機(jī)制的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

2 郭磊磊;電針對(duì)心肌梗死并抑郁模型鼠行為學(xué)及海馬神經(jīng)可塑性的分子機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2009年

3 周廣宇;狼瘡模型鼠各臟器TCR Vβ基因的表達(dá)及T細(xì)胞克隆性分析[D];吉林大學(xué);2004年

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5 李智;靶向Kv1.3多肽對(duì)EAE模型大鼠的治療作用及機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2013年

6 寧昌;補(bǔ)體在潰瘍性結(jié)腸炎癌變中的作用及機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

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1 金偉;狼瘡模型鼠體內(nèi)氧化/抗氧狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

2 林亞平;盆寧顆�？寡卓拐尺B機(jī)制的研究[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

3 祝佳麗;中華眼鏡蛇蛇毒在系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型鼠體內(nèi)發(fā)揮的藥效和機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2013年

4 王睿;生津口服液對(duì)干燥綜合征模型鼠治療機(jī)理的初步研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

5 呂妍;芳香化濕法及代表方藥對(duì)D-IBS模型鼠腸動(dòng)力、水液代謝及相關(guān)胃腸激素調(diào)控機(jī)理研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

6 劉星;埃他卡林對(duì)rotenone帕金森病模型鼠的保護(hù)作用及ATP敏感性鉀通道對(duì)BV-2細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

7 呂志芬;sTNFR-Fc在CIA模型鼠中的療效觀察及其對(duì)OPN的影響[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

8 田鎮(zhèn)溥;TMEM16A和TMEM16B在CCI模型鼠DRG神經(jīng)元上的表達(dá)[D];石河子大學(xué);2015年

9 王朦夏;淫羊藿苷對(duì)EAE模型鼠的治療作用及其對(duì)HPA軸的影響[D];廣東藥學(xué)院;2013年

10 曹湘博;V_E干預(yù)D-半乳糖亞急性中毒擬衰老模型鼠免疫衰老實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

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