不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子β1體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的研究
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【摘要】:目的:研究不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)在體外定向誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向心肌樣細(xì)胞分化的能力。方法:取SD大鼠四肢骨骨髓,密度梯度離心法分離大鼠BMSCs,以TGF-β1 5μg/L(低劑量組)、10μg/L(高劑量組)對第3代BMSCs進(jìn)行體外誘導(dǎo),未誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞做對照。相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),MTS試劑盒檢測細(xì)胞活性。分化14天后,流式細(xì)胞儀分析三組細(xì)胞DNA周期;免疫熒光法鑒定心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin,c Tn I)、心肌平滑肌肌動蛋白(aactin)和心肌肌球蛋白重鏈(myosin heavy chain,MHC)的表達(dá)率。結(jié)果:三組細(xì)胞均呈對數(shù)生長趨勢,誘導(dǎo)組細(xì)胞數(shù)量增長較對照組緩慢(P0.05),誘導(dǎo)組之間比較,細(xì)胞增長無明顯差異。分析細(xì)胞DNA周期顯示:誘導(dǎo)14天后,對照組增殖指數(shù)明顯高于誘導(dǎo)組(P0.05),不同濃度誘導(dǎo)組之間比較,細(xì)胞增殖指數(shù)無明顯差異。免疫熒光法檢測結(jié)果顯示:誘導(dǎo)14天后,誘導(dǎo)組細(xì)胞均部分表達(dá)c Tn I、α-actin及MHC,TGF-β1高劑量組細(xì)胞轉(zhuǎn)化率高于低劑量組;對照組均不表達(dá)c Tn I、α-actin及MHC。結(jié)論:10μg/L TGF-β1與5μg/L TGF-β1比較,更有效促進(jìn)BMSCs體外向心肌樣細(xì)胞分化,且對細(xì)胞增殖活性無明顯影響。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院;北京市心肺血管疾病研究所重癥監(jiān)護(hù)中心;
【關(guān)鍵詞】: 轉(zhuǎn)化生長因子-β 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌樣細(xì)胞 分化 大鼠
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號:81270284,81070166) 北京市自然科學(xué)基金(編號:7141003)
【分類號】:R329
【正文快照】: 20世紀(jì)80年代以來,我國冠心病發(fā)病率和病死率呈上升趨勢,已成為影響人群健康的主要威脅之一,心肌梗死是冠心病最嚴(yán)重的類型,其致死率和致殘率高達(dá)13%,傳統(tǒng)治療方法在一定程度上改善了癥狀,但對梗死區(qū)的死亡心肌細(xì)胞修復(fù)卻束手無策。大量臨床前實驗表明,間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)作為
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,本文編號:595093
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