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表達(dá)綠色熒光蛋白的布魯氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬細(xì)胞過程的差異分析

發(fā)布時(shí)間:2017-07-27 04:02

  本文關(guān)鍵詞:表達(dá)綠色熒光蛋白的布魯氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬細(xì)胞過程的差異分析


  更多相關(guān)文章: 布魯氏菌 綠色熒光蛋白(GFP) 小鼠巨噬細(xì)胞 激光共聚焦顯微鏡 流式細(xì)胞儀


【摘要】:通過布魯氏菌(Brucella)16M(強(qiáng)毒株)和M5(弱毒株)進(jìn)入小鼠巨噬細(xì)胞后產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度,結(jié)合布魯氏菌胞內(nèi)生存能力分析二者侵染小鼠巨噬細(xì)胞過程的差異,為布魯氏菌在細(xì)胞內(nèi)的生存繁殖及其分子機(jī)制研究提供理論依據(jù)。將綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)布魯氏菌16M(強(qiáng)毒株)和M5(弱毒株)分不同時(shí)間段侵染小鼠巨噬細(xì)胞(感染復(fù)數(shù)為100∶1),通過胞內(nèi)生存實(shí)驗(yàn)、激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀觀察和檢測(cè)布魯氏菌侵入RAW 264.7過程的差異。結(jié)果表明,布魯氏菌16M和M5和GFP的16M和M5侵染RAW264.7的能力不受影響,通過流式細(xì)胞儀可以鑒別GFP布魯氏菌,但是不能確定細(xì)菌的存活狀態(tài)。結(jié)合布魯氏菌16M和M5胞內(nèi)生存能力分析發(fā)現(xiàn)GFP+細(xì)胞的增加與活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)法(colony forming unit,CFU)數(shù)量的減少存在一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系,并且在侵染初期(5~25 min)16M與M5的熒光強(qiáng)度并沒有顯著差異。結(jié)果提示,布魯氏菌16M和M5在侵染進(jìn)入宿主細(xì)胞的初期即侵襲能力并沒有明顯差異,認(rèn)為造成毒力差異的主要原因是兩者的繁殖能力。
【作者單位】: 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】布魯氏菌 綠色熒光蛋白(GFP) 小鼠巨噬細(xì)胞 激光共聚焦顯微鏡 流式細(xì)胞儀
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(2010-CB530200)
【分類號(hào)】:R378.5
【正文快照】: 布魯氏菌屬于革蘭氏陰性胞內(nèi)菌,可以對(duì)人類和家畜造成嚴(yán)重的慢性感染。人若患有此病會(huì)經(jīng)常發(fā)高燒,精神萎靡,嗜睡,關(guān)節(jié)炎和脾腫大。在反芻動(dòng)物中,布魯氏菌病可導(dǎo)致流產(chǎn),造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)布魯氏菌沒有典型的外毒素、Ⅲ型分泌系統(tǒng)等毒力元件,其毒力主要表現(xiàn)

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳俊;吳敏;施永超;達(dá)劍森;;布魯氏菌病的研究進(jìn)展[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2014年01期

2 馬慧;茍亞峰;劉朋濤;高劍峰;;綿羊布魯氏菌侵染小鼠巨噬細(xì)胞的熒光表征與分析[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 葉婷;小G蛋白R(shí)ab6和Ran在對(duì)蝦和果蠅細(xì)胞吞噬及抗病毒中的作用[D];浙江大學(xué);2012年

2 張敏;流產(chǎn)布氏桿菌脂多糖突變株ΔrfbE和ΔrfbD的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2013年

3 田明星;流產(chǎn)布魯氏菌毒力基因篩選鑒定及其功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李闖;綿羊細(xì)胞分裂周期蛋白42全長cDNA克隆、表達(dá)及單克隆抗體制備[D];延邊大學(xué);2013年

2 呂亞輝;布魯氏菌Omp25蛋白抑制巨噬細(xì)胞分泌TNF-α的分子機(jī)制研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

3 桂丹;牛種布魯氏菌2308株wbkA、pmm基因缺失株的構(gòu)建及免疫效果的初步研究[D];石河子大學(xué);2013年

4 任曉莉;布魯氏菌強(qiáng)弱毒株誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡機(jī)制初步研究[D];石河子大學(xué);2013年

5 王慧;布魯氏菌外膜蛋白OMP31在細(xì)胞凋亡中的調(diào)控研究[D];石河子大學(xué);2013年

6 王震;牛種布魯氏菌強(qiáng)弱毒株差異表達(dá)蛋白的功能研究[D];石河子大學(xué);2013年

7 李天森;牛種布魯氏菌主要外膜蛋白對(duì)胞內(nèi)生存機(jī)制的初步研究[D];石河子大學(xué);2013年

8 陳瑞花;布魯氏菌omp25基因缺失株的構(gòu)建及對(duì)細(xì)胞自噬的影響[D];石河子大學(xué);2013年

9 張?jiān)?布魯氏菌感染巨噬細(xì)胞對(duì)致炎信號(hào)通路影響的初步研究[D];石河子大學(xué);2013年

10 趙云;B0107基因和A1103基因的刪除對(duì)布魯氏菌M28強(qiáng)毒株毒力的影響[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙振祥;趙鴻雁;崔步云;李蘭玉;樸冬日;郝素珍;;布魯氏菌強(qiáng)毒株16M和疫苗株M5差異探索[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2009年10期

2 馮建萍,徐歷升,田廣,胡桂英;布魯氏菌M5號(hào)菌苗畜間氣霧免疫對(duì)人群影響的評(píng)價(jià)[J];地方病通報(bào);1996年03期

3 邵水兒;盧興國;龔旭波;;外周血白血病和MPO陰性M5病例報(bào)告[J];浙江臨床醫(yī)學(xué);2007年12期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉惠芬;周文華;朱華強(qiáng);賴苗軍;陳為升;劉芳;楊國棟;;VTA中微注射M5毒蕈堿受體反義寡核苷酸抑制海洛因敏化大鼠NAc和海馬中FosB表達(dá)[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 修霄云;瑞風(fēng)M5:中國式公商務(wù)軒駕的造型典范[N];政府采購信息報(bào);2013年

2 本報(bào)記者  徐鋒;寶馬借勢(shì)推出M5、M6[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 宋俊杰;基于M5的片上多核系統(tǒng)平臺(tái)的設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2010年



本文編號(hào):579661

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