成肌細(xì)胞體外培養(yǎng)-力學(xué)刺激模型與周期性張應(yīng)力的影響
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【摘要】:背景:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展過程,如動脈粥樣硬化、糖尿病、阿爾茨海默病,GRP78是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的標(biāo)志蛋白,GRP78的表達(dá)水平反映內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的程度。目的:研究周期性張應(yīng)力對L6大鼠成肌細(xì)胞GRP78表達(dá)的影響,以明確周期性張應(yīng)力與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)系。方法:在成功構(gòu)建L6大鼠成肌細(xì)胞體外培養(yǎng)力學(xué)刺激模型的基礎(chǔ)上,采用RT-PCR和Western blot法分析周期性張應(yīng)力對GRP78 mRNA和蛋白表達(dá)的影響。加力組分別給予1,6,12,24 h的力學(xué)刺激,加載頻率為10 cycles/min,拉伸變形幅度為15%。對照組與實(shí)驗(yàn)組在同時(shí)種板,不給予力刺激。結(jié)果與結(jié)論:GRP78 mRNA隨著加力時(shí)間的延長呈一致上升趨勢,與對照組相比,差異均有顯著性意義(P0.05);GRP78蛋白在加力1 h后,蛋白表達(dá)量開始升高,加力6 h后蛋白表達(dá)量顯著升高,到24 h達(dá)到峰值,與對照組相比,差異均有顯著性意義(P0.05)。由以上結(jié)果得出,在一定時(shí)間范圍內(nèi),周期性張應(yīng)力可引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,并且隨著時(shí)間的延長逐漸增強(qiáng);持續(xù)的應(yīng)力刺激,可引起嚴(yán)重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致成肌細(xì)胞凋亡。
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市立醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)中心;泰安市口腔醫(yī)院;濰坊市人民醫(yī)院口腔科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 實(shí)驗(yàn)動物 組織構(gòu)建 GRP 周期性張應(yīng)力 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 L 成肌細(xì)胞 功能矯形 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31170891)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):1成功構(gòu)建了成肌細(xì)胞體外培養(yǎng)-力學(xué)刺激模型,很好的模擬了體內(nèi)的力學(xué)刺激環(huán)境,為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。2闡明功能矯形狀態(tài)下肌肉適應(yīng)性改建的細(xì)胞及分子機(jī)制,首次證明GRP78及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在周期性張應(yīng)力介導(dǎo)的成肌細(xì)胞適應(yīng)性改建中的作用及其機(jī)制,為豐富細(xì)胞生
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